从体外药效学看科赛斯的杀菌作用.pptxVIP

从体外药效学研究 看卡泊芬净的杀菌作用 Diagn Microbiol Infect Dis. 1999;33(2):75-80. Antimicrob Agents Chemother. 2002;46(11):3634-6. 卡泊芬净体外药效学研究 -2- 卡泊芬净直击真菌细胞壁 麦角甾醇 -(1,6)-葡聚糖 甘露糖蛋白 -(1,3)-葡聚糖 -(1,3)- 葡聚糖合成酶 GS 真菌细胞壁 真菌细胞膜 磷脂双分子层 -3- Curr. Med. Chem. – Anti-Infective Agents, 2002;1:65-81. 核酸合成 卡泊芬净 作用机制：抑制葡聚糖合成酶 作用靶点：细胞壁 研究设计 MIC=最小抑菌浓度； MFC=最小杀菌浓度 -4- Diagn Microbiol Infect Dis. 1999;33(2):75-80. 卡泊芬净在Ⅱ期临床研究期间 进行的一项体外药效学特性试验 研究设计 比较三种检测方法 (MIC、MFC及时间-杀菌曲线) 对卡泊芬净体外药效学特性的测定，同时采用电子显微镜观察真菌超微结构的变化 研究目的 药物及菌株的准备 试验药物：卡泊芬净 卡泊芬净［MK-0991 (L-743,872)］由MSD公司提供 采用0.165 M 吗啡啉丙磺酸将RPMI (无血清细胞冻存培养基)1640 的PH值调整至7.0 原液按单位分装，储存在-70℃ 原液保存在培养基中，以备整个试验所用 受检分离菌株： 取自美国爱荷华大学医疗中心医学微生物科菌株库 白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌各2株 其中一株白念珠菌为ATCC(美国美典型菌种储存中心)90028菌株，其他均为临床菌株 -5- Diagn Microbiol Infect Dis. 1999;33(2):75-80. 测定方法 测定方法： 抗真菌药敏试验：根据美国临床实验室标准(NCCLS 1997)，采用微量液基稀释法进行药敏试验 MIC：孵化48h后读取 MIC80%：目测抑菌达到80% MIC80%：光谱测定80%抑菌 MIC100%：目测完全抑制真菌生长，以首次清除为准 MFC：读取MIC后读取 时间-杀菌曲线 电子显微镜扫描 -6- Diagn Microbiol Infect Dis. 1999;33(2):75-80. 电子显微镜检测证实：卡泊芬净具有明确的杀菌作用 -7- Diagn Microbiol Infect Dis. 1999;33(2):75-80. 电镜照片(比例尺为1 mm) 正常生长的白念珠菌 萌芽及分支完整 暴露在卡泊芬净下的白念珠菌 (1×100%最小抑菌浓度) 无完整真菌细胞，仅有细胞残片 杀 菌 临床启示 卡泊芬净抑制细胞壁的β-(1,3)-葡聚糖合成酶，毒性作用小 体外抗真菌活性研究证实：针对念珠菌属，卡泊芬净具有明确的抑菌及杀菌作用 -8- 作用靶点 杀菌作用