甘草总黄酮的提取.docVIP

甘草总黄酮的提取工艺研究 摘要：目的：用正交法研究提取甘草中的甘草总黄酮类化合物最佳提取工艺。方法：选取乙醇浓度、提取时间、温度、料液比个主要影响因素，采用正交法，以甘草总黄酮类化合物得率作为检测指标。结果：应用酸溶碱沉法获得甘草总黄酮类化合物的最佳提取工艺是：75%的乙醇，提取2h，酸沉PH为2.5，液料比为20:1。结论：该方法提取率高，稳定性好，操作简便，适合工业化生产。 关键词：甘草 甘草总黄酮 正交设计 提取工艺 甘草为双子叶植物豆科甘草，胀果甘草， 或光果甘草的根及 根茎。始载于《神农本草经》，列为上品。甘草性平，味甘，归十二经。有解毒、祛痰、止痛、解痉以至抗癌等药理作用。在 中医上，甘草补脾益气，滋咳润肺，缓急解毒，调和百药。临床应用分“生用”与“蜜炙”之别。生用主治 咽喉肿痛，痛疽 疮疡，胃肠道溃疡以及解药毒、食物中毒等；蜜炙主治脾胃功能减退，大便溏薄，乏力发热以及咳嗽、心悸等。甘草是我国传统常用中草药之一，也是我国重要的植物资源[1]。甘草黄酮类成分是甘草中最重要的活性成分之一，具有抗氧化、抗肿瘤、增强心血管功能、增强免疫力等作用[2-5]。因此，开展甘草的深加工，使甘草资源得以充分利用，增加资源的附加值，前景十分可观。为此，笔者以甘草为对象，研究了甘草黄酮的乙醇回流提取工艺，单因素试验确定各因素对提取工艺的影响，正交试验确定甘草黄酮提取的最佳工艺条件。 1、仪器与试药 1.1仪器:烧杯、容量瓶、移液管、玻璃棒、量筒、回流装置、滤纸、HH24数显恒温水浴锅、分析天平、AB1042N电子天平、布氏漏斗、SHZ2C型循环水多用真空泵 1.2试剂:甘草，市售;试剂:蒸馏水、氢氧化钠、盐酸 2、方法与结果 在利用碱溶酸沉法从甘草中获得甘草总黄酮的过程中，我们通过预试验发现影响提取得率的主要因素为乙醇浓度、提取时间、温度、料液比。故选择乙醇浓度(A)、提取时间(B)、酸沉pH值(C)、料液比(D)作为考察的四个因素，各取三个水平(见表1)，以甘草总黄酮得率(%)为考察指标。提取工艺与试验结果、方差分析和验证试验结果依次见表2、表3、和表4 2.1正交试验设计 2.1.1正交因素水平设计 采用碱溶酸沉法进行提取，选择乙醇浓度、提取时间、酸沉PH值、料液比四个因素，每个因素选择三个水平，设计正交试验因素水平表(见表1) 表1 正交因素水平设计表 Table1 Orthogonal design factor level table 水平 因素 A 乙醇浓度(%) B 提取时间(h) C 酸沉PH值 D 液料比 1 65 1.5 3.0 15 2 75 2.0 2.5 20 3 85 2.5 2.0 25 2.1.2正交试验设计结果 分别取药材10g，按上述L9(34)正交表方案进行试验，以最后甘草总黄酮得率 表2 正交试验设计及结果 Table2 Orthogonal test design and results 实验号 因素 结果 A B C D 1 1.0000 1.0000 1.0000 1.0000 2.31 2 1.0000 2.0000 2.0000 2.0000 2.41 3 1.0000 3.0000 3.0000 3.0000 2.42 4 2.0000 1.0000 2.0000 3.0000 2.44 5 2.0000 2.0000 3.0000 1.0000 2.53 6 2.0000 3.0000 1.0000 2.0000 2.45 7 3.0000 1.0000 3.0000 2.0000 2.41 8 3.0000 2.0000 1.0000 3.0000 2.35 9 3.0000 3.0000 2.0000 1.0000 2.36 K1 7.1400 7.1600 7.1100 7.2000 K2 7.4200 7.2900 7.2100 7.2700 K3 7.1200 7.2300 7.3600 7.2100 R 0.3000 0.1300 0.2500 0.0700 SS 0.0188 0.0028 0.0106 0.0010 表3 方差分析表 Table3 Analysis of Variance Table 方差来源 离差平方和SS 自由度f 均方S F值 显著性P A 0.0188 2.0000 0.0094 19.6279 P0.05 B 0.0028 2.0000 0.0014 2.9535 P0.05 C 0.0106 2.0000 0.0053 11.0465 P0.05 D 0.0010 2.0000 0.0005 1.0000 P0.05 2.13 结果分析 由直观分析可知，利用水提醇沉法提取甘草总黄酮的过程中，影响提取效果的因