双抗体夹心法 固相抗体和Eu3+标记抗体与待检抗原结合,形成固相抗体-待检抗原-Eu3+标记抗体复合物,酸性增强液下,Eu3+解离,340nm激发光下发射613nm荧光。 时间分辨荧光免疫测定 auto DELFIA全自动时间分辨荧光免疫检测系统 1. TRFIA分析用的酸性增强液易受环境、试剂、容器等里面的镧系元素污染,使本底升高,所用试剂和器材应尽量防尘。 2.TRFIA分析用载体最常用的是聚苯乙烯微96孔板,其荧光本底低,并有洗涤微孔板的自动装置,但不同厂家生产的微孔板,所产生的荧光有很大差异,应选择应用。 注意事项 荧光偏振免疫测定 (fluorescence polarization immunoassay,FPIA) 为一种均相荧光免疫测定方法,利用荧光物质在溶液中被单一平面的偏振光照射后,可吸收光能而产生另一单一平面的偏振发射荧光,该荧光强度与荧光 标记物质在溶液中旋转的速度与分子大小呈反比,常采用抗原-抗体竞争反应原理,适用于小分子半抗原(如药物浓度)的检测。 ? 二、荧光偏振免疫分析仪 样品 激发 垂直偏振光 (458nm)蓝色 偏振镜 FPIA分析仪检测 光源 小分子物,旋转快,低荧光偏振 Ag Ab Ag 大分子物,旋转慢,高荧光偏振 偏振荧光 (525~550nm)绿色 发射 FPIA原理 AXSYM全自动酶标记荧光免疫分析
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