HLA-类抗原-昆明医科大学.ppt

许冰莹 昆明医科大学法医学院Tel:0871Email:bingying_xu@126.com;;;器官移植（Organ transplant）; 第九章 白细胞血型 Blood type of White blood cell; 第九章 白细胞血型Blood type of White blood cell; 第九章 白细胞血型 Blood type of White blood cell  概 述（Summary）;1.人类最复杂的显性遗传多态性系统(The most complex Dominant genetic polymorphism system)2.人类基因组中基因密度最高的区域(The gene density is the highest region of the human genome );;二.HLA 系统功能(The HLA system function);三.HLA基因（HLA gene）;＊单倍型（HAPLOTYPE); 第一节HLA抗原（HLA Antigen）;二.HLA研究历史 (Research history);三.HLA抗原结构及其分布（Structure and distribution of HLA antigen） ;1.HLA-I类抗原的结构（HLA-I antigen structure）;HLAⅠ类抗原;2.HLA-II类抗原的结构（HLA-II antigen structure） ;HLA Ⅱ 类抗原;3.HLA抗原的细胞分布 （HLA antigen distribution of cell）;成熟红细胞上没有HLA-A、B、C和DR抗原，幼稚红细胞有。 血小板除自身带有HLA-Ⅰ类抗原外，还可以从血浆中吸附可溶性 HLA 抗原。 ; （2） HLA-类抗原（HLA-Ⅱ antigen ）： 含有 HLA-Ⅱ类抗原的组织比Ⅰ类抗原少 得多，密度最高者为树突状细胞、单核细 胞，一些吞噬细胞亚群及 B 细胞。;第二节 HLA命名（Naming）;第三节 HLA遗传（HLA genetic） ;;;2.HLA-Ⅱ类基因(HLA-Ⅱ gene) DNA 片段长1000-1200kb,含有6个外显子和5个内 含子。多态性主要由第2外显子决定。 包括DR、DQ 和 DP 基因座，编码HLA-Ⅱ类区域的 主要基因表达产物。;二.HLA遗传特征( Genetic characteristics);二.HLA遗传特征( Genetic characteristics);HLA的单倍型遗传图; ; 二.HLA遗传特征( Genetic characteristics) ;3.连锁不平衡（linkage disequilibrium） 说明 HLA 不同基因座的基因之间存在关联，具有一同遗 传的趋向。 在法医物证学数据分析中，HLA 不同基因座的累积概率 不能简单使用各基因频率的乘积，而应该用单倍型频率。否 则会导致过高或过低估计HLA系统的鉴定能力。 ;三.HLA群体分布（Population distribution） ;第四节 HLA分型（HLA typing）;三.DNA分型 ;（一）PCR-RFLP分型方法 (PCR- restricion fragment lenth polymorphism);（二）PCR-SSO分型方法 ; 2.PCR-微量滴度板杂交法（PCR-Microtiter Plate Hybridization， PCR-MPH） 将 SSO 探针杂交检测转移到微量滴度板上完成，这 种方法与酶联免疫吸附试验 （ELISA）十分相似。 先用一对带有生物素标记的引物对某一 HLA 基因座 进行 扩增。等位基因序列特异性探针则预先固相化在微 量滴度板孔中，PCR 产物在孔中与探针发生特异性杂 交，杂交产物带有生物素而能与亲和素结合，通过亲和 素所带酶的底物反应显色，最终显示特异性杂交结果。 ;（三）序列特异性引物PCR （PCR-SSP分型）  （PCR-Sequence- Specific Primers）;HLA-SSP分型结果;（四）DNA测序分型方法（sequencing）;四.血清学分型和 DNA分型方法可靠性比较 ; 第五节 HLA的应用（The application of HLA）;二.器官、骨