烟草dna的提取跟srap反应体系的建立资料精.pdfVIP

维普资讯 梁景霞等 烟草 DNA的提取与 SRAP反应体系的建立 33 烟草 DNA的提取与 SRAP反应体系的建立* 梁景霞 祁建 民 吴为人 周东新 陈顺辉 王 涛 陶爱芬 摘 要 以 l0个烟草栽培品种为试验材料 ，研究 了烟草 DNA的提取方法以及对建立烟草 SRAP—PCR反应体系的影 响因子设置梯度实 验 ，筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳 SRAP—PCR反应条件 ：在 25 的反应体 系 中，Mgcl2．0 。l、 dNTP20Ogmol，上下引物各 30ng、DNA模板 40ng、DNA聚合酶 1．5u，扩增程序为 ：在 94~C预变性 5min，反应前 5个循环在 94~Clmin， 33~C1mln，72℃1rain条件下运行 ；随后 的30个循环复性温度提高到53~12，最后72℃延伸 5min。本文还讨论 了不同分子标记在烟草 中 应用 的优缺点以及 S