方法验证报告.doc

PAGE 新方法开发报告 方法名称：液相色谱-串联质谱法 检测水中的丙烯酰胺 报告编写人： 杨泽芳 报告日期： 2015 年 10 月 16 日 1、本方法适用于城市供水及其水源水中的丙烯酰胺的测定 若进样量为50uL，则本方法的测定下限为0.02ug/L 2、原理 丙烯酰胺直接进样通过液相色谱仪分离后进入串联质谱，通过定性、定量离子进行测定。 3、试剂和材料 3.1 甲醇：色谱纯 3.2 纯水：MILI-Q 生产 3.3丙烯酰胺标准溶液（1000mg/L）：上海育惠原 3.4 高纯氮气（99.999%） 3.5 高纯氩气（99.999%） 4、仪器 4.1液相色谱-串联质谱 4.2离子源：可加热的电喷雾离子源 4.3 色谱柱：HypersiL GOLD100*2.1mm 1.9um颗粒度 4.4移液器：10uL、100uL、1000uL 4.5 进样瓶 5、样品 5.1 样品采集：使用干净干燥的棕色玻璃瓶采集样品，注满容器不留空气。 5.2样品保存：4℃避光保存，12h内测定。 5.3 样品前处理：用移液器吸取1mL干净的样品放入样品瓶待测。 6、分析步骤 6.1 液相色谱条件：流速0.2mL/min，柱温：30℃，进样量50uL 时间（min） 水 甲醇 0 98 2 2 4 96 6 4 96 7 98 2 6.2 质谱条件： 物质 CAS号 母离子 定量离子 定性离子 丙烯酰胺 79-06-1 72.2 55.4 44.5 7、 标准曲线 标准曲线的绘制：分别取5种不同浓度的标准曲线校准溶液装入自动进样器，其中一种浓度须接近方法定量极限。以定量离子峰面积或峰高为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。每次分析样品时，用新配制的使用液绘制标准曲线。校准溶液进样体积与试样进样体积相同，校准样品与试样同时进样分析。 取浓度为10ug/L的丙烯酰胺标准溶液，吸取0、10、30、50、100、200，300μL标准使用溶液稀释至1mL超纯水中，配成浓度为0、0.10、0.30、0.50、1.00、2.00、3.00μg/L的标准系列，平行配制3组，进行测定。各组分的线性相关系数填入下表 校准曲线的线性相关系数 线性相关系数 化合物 1 2 3 平均值 丙烯酰胺 0.9966 0.9971 0.9946 0.9961 8、结果计算 根据样品峰面积在标准曲线上查出相应的质量浓度。结果计算见下式： A-b ρ= k ρ水样中丙烯酰胺的质量浓度，单位为ug/L； A样品峰面积； k标准曲线的斜率； b标准曲线的截距。 9、 检测限 在水中加丙烯酰胺标准溶液0.10μg/L实际检测数据 化合物 加标浓度0.10μg/L (n=7) 平均值 （μg/L） 标准偏差 （μg/L） 方法检测限 （μg/L） 1 2 3 4 5 6 7 丙烯酰胺 0.10 0.10 0.10 0.11 0.09 0.10 0.10 0.10 0.0058 0.02 10、精密度和准确度 在水中的丙烯酰胺加标0.10μg/L得到的方法的精密度和准确度 化合物 加标浓度0.10μg/L (n=7) 平均值 （μg/L） 精密度 %RSD 准确度 %平均回收率 1 2 3 4 5 6 7 丙烯酰胺 0.10 0.10 0.10 0.11 0.09 0.10 0.10 0.10 5.8 100.0 在水中的丙烯酰胺加标1.0μg/L得到的方法的精密度和准确度 化合物 加标浓度1.0μg/L (n=7) 平均值 （μg/L） 精密度 %RSD 准确度 %平均回收率 1 2 3 4 5 6 7 丙烯酰胺 1.03 1.06 0.98 1.09 1.09 0.96 1.04 1.04 4.9 103.6 在水中的丙烯酰胺加标3.0μg/L得到的方法的精密度和准确度 化合物 加标浓度3.0μg/L (n=7) 平均值 （μg/L） 精密度 %RSD 准确度 %平均回收率 1 2 3 4 5 6 7 丙烯酰胺 3.05 3.0 2.96 2.95 2.99 3.06 2.98 3.0 1.4 99.95 11、质量控制 每六个月制作标准曲线，每10个样品，做平行一次，加标回收一次，回收率超过70%-120%时，重新制作标准曲线