新型喹乙醇残留标志物人工半抗原的设计及其在动物-中国兽药杂志.pdf

·２２· 中国兽药杂志 ２０１６，５０（２）：２２～２８／白玉惠，等　 新型喹乙醇残留标志物人工半抗原的设计及其 在动物组织残留检测中的应用  白玉惠，王鹤佳，刘智宏 ，黄耀凌，徐士新 （中国兽医药品监察所，北京１０００８１） ［收稿日期］２０１５－１２－０２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００２－１２８０（２０１６）０２－００２２－０７　［中图分类号］Ｓ８５９．８４ ［摘　要］　为提高酶联免疫方法测定喹乙醇残留标志物（ＭＱＣＡ）的检测性能，设计了一种新型 ＭＱＣＡ人工半抗原，该半抗原既完整保留ＭＱＣＡ分子特征性基团和结构，又具有便于和蛋白质载体 偶联的基团－ＮＨ。通过三步化学反应合成该半抗原，将其与蛋白质载体偶联成为免疫抗原后，进 ２ 一步制备特异性抗体，研制了ＭＱＣＡ酶联免疫试剂盒，灵敏度高，特异性好，ＩＣ 为１．９４ ｇ／Ｌ。建立 ５０ μ 了测定动物性产品中ＭＱＣＡ残留量的直接竞争酶联免疫法，测定猪肝、猪肉、鸡肉、鸡蛋中ＭＱＣＡ的 检测限分别为０．４２、０．２３、０．２８、０．２８ ｇ／ｋｇ。猪肉中不同添加浓度ＭＱＣＡ（１，２，４ ｇ／ｋｇ）的回收率 μ μ 为７０％ ～９７％；批内、批间变异系数均低于 １２％。本试剂盒可同时快速检测大批样品，有望在 ＭＱＣＡ残留检测中发挥重要作用。研究有助于指导小分子药物半抗原的合理设计，为现有的半抗原 设计方法提供新的理念和思路。 ［关键词］　喹乙醇残留标志物；半抗原设计；酶联免疫分析；残留检测 ＡＮｏｖｅｌＨａｐｔｅｎＤｅｓｉｇｎｆｏｒＭａｒｋｅｒＲｅｓｉｄｕｅｏｆＯｌａｑｕｉｎｄｏｘａｎｄＩｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｎｔｈｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｓｉｄｕｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎＡｎｉｍａｌＴｉｓｓｕｅｓ  ＢＡＩＹｕ－ｈｕｉ，ＷＡＮＧＨｅ－ｊｉａ，ＬＩＵＺｈｉ－ｈｏｎｇ，ＨＵＡＮＧＹａｏ－ｌｉｎｇ，ＸＵＳｈｉ－ｘｉｎ （ＣｈｉｎａＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）ｆｏｒ ｍａｋｅｒｒｅｓｉｄｕｅｏｆＯｌａｑｕｉｎｄｏｘ（ＭＱＣＡ），ａｎｏｖｅｌｈａｐｔｅｎｏｆＭＱＣＡｗａｓｄｅｓｉｇｎｅｄ．Ｔｈｉｓｈａｐｔｅｎｋｅｅｐｓｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｇｏｕｐｓｏｆＭＱＣＡ，ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｌｙ，ｉｔｃａｎｂｅｅａｓｉｌｙｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｐｒｏｔｅｉｎｃａｒｒｉｅｒａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏｉｔｓ ＮＨ．Ｔｈｅｈａｐｔｅｎｗａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｉｎｖｏｌｖｉｎｇｉｎｔｈｒｅｅｓｔｅｐｓ．Ｂａｓｅｄｏｎｉｔｓｃｏｕｐｌｉｎｇｗｉｔｈｐｒｏｔｅｉｎｔｏｂｅｃｏｍｅ ２ ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｇｅｎ，ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄ．ＡｒａｐｉｄｄｉｒｅｃｔｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅＥＬＩＳＡｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔ ＭＱＣＡｉｎａｎｉｍａｌｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅａｎｔｉｂｏｄｙｓｈｏｗｅｄｈｉｇｈｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｗｉｔｈｔｈｅＩＣ ｂｅｉｎｇ ５０ １．９４ ｇ／Ｌ．ＴｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＭＱＣＡｉｎｌｉｖｅ