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朝陽科技大學應用化學系生化科技碩士班 Master Program in Biochemical Technology, Department of Applied Chemistry Chaoyang University of Technology 碩士論文 Thesis for the Degree of Master 粉防己毛狀根大量生產粉防己鹼之研究 Study on Mass Production of Tetrandrine in Stephania tetrandra S. Moore Hairy root 指導教授︰詹効松 博士（Dr. Hsiao-Sung Chan ） 研究生︰楊志豪 （Chih-Hao Yang ） 中華民國 101 年11月 26日 November 26 ﹐2012 中文摘要 粉防己為防已科千金藤屬草本植物，田間栽培5-8 年之粉防己地下塊根可供藥材使 用，粉防己鹼（ Tetrandrine ）為中草藥植物粉防己（Stephania tetrandra S. MOORE ）特有 二次代謝物，具有抗發炎、抗氧化等功效，並能有效抑制結腸癌細胞生長與抗血小板凝 集之作用。本研究室誘導所得生長快速之粉防己毛狀根經培養5週後，其粉防己鹼含量 可高於市售藥材（ 4.52 mg/g ）達6.75 mg/g 。初步於時序培養過程中探討 培養基之導電 度對線上監測毛狀根生質量之可行性，結果可由時序培養得知增加的生質量與減少的導 2 電度之關係式推得之關係式 R 為 0.9987 ，表示導電度的下降可準確作為線上監測毛狀 根的生質量之根據；由生長勢知 3-5週為毛狀根之對數生長期，進一步於三角錐形瓶中 培養毛狀根 5週 ，於第 4週添加誘引劑尋求對粉防己鹼含量之顯著因子 ，結果顯示 ，於 第 4週添加 ABA （1 ppm）、L-Proline （10 mM）粉防己鹼含量與粉防己鹼產量皆達最高， 粉防己鹼含量為10.96 與10.59 mg/g ，分別為對照組之1.31 倍與 1.26 倍，粉防己鹼產 量為 82.26 與80.44 mg/L ，分別為對照組之1.26 倍與 1.23 倍。於5 L氣泡塔 生物反應 器（ bubble column bioreactor ）探討初始接種量（1, 3, 5及 7 g ）對毛狀根生質量、粉防 己鹼含量及產量之影響。接種不同重量之毛狀根於內含 3.5 L WPM培養基之 5 L氣泡生 物反應器中培養5週，固定通氣量為 50 mL/min 進行詴驗，分析其生質量、粉防己鹼含 量與計算增長倍數（ GI值）。其接種量為 1和 7 g fw/batch ，有最低及最高生質量，分別 為21.41 g fw/L （1.87 g dw/L ）與61.42 g fw/L （10.73 g dw/L），反之，接種量為1和 7 g fw/batch ，則有最高及最低增長倍數（GI ），分別為69.63 與26.90 。 關鍵字 ：粉防己、毛狀根、誘引劑、粉防己鹼、氣泡塔 生物反應器 I Abstract Stephania tetrandra S. Moore, an important Chinese medicinal plant, belongs to the family Menispermance and it has long been used in folk medicine for the treatment of edema, gastric ulcer, duodenal ulcer, hypertension, gastroenteritis, dysentery, snake bite, boils, furuncles, oliguria, g