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电子显微镜样品制备与观察 河北大学生命科学学院 主要内容 样品的取材与固定 样品的渗透与包埋 修快与支持膜的制备 玻璃刀的制作与超薄切片 电子染色 电子显微镜的使用与生物样品超微结构观察 一、样品的取材与固定 （一）实验目的 1 掌握电镜样品取材的方法与要求 2 掌握电镜样品的固定方法与要求 （二）实验原理 （见原理部分） （三）实验材料 小白鼠肝脏（等） （四）实验方法 1 动物麻醉 将小白鼠放入烧杯，放入一蘸有氯仿的脱脂棉球，用培养皿盖住烧杯口，约3～5min后小白鼠被麻醉； 2 解剖分割 迅速解剖，取出肝脏，在硬纸上用新单面刀片分割成0.5*0.5*0.5mm3 小块，迅速投入准备号的固定液； 3 前固定 2.5%戊二醛0~4℃固定1~2h（固定液需提前准备号）； 4 漂洗 0.1M磷酸缓冲液漂洗3次，每次5～10min,0～4℃； 5 后固定 1％鋨酸固定1～2h，0～4℃； 6 漂洗 0.1M磷酸缓冲液漂洗3次，每次5～10min,0～4℃； 7 脱水 30％乙醇→ 50％乙醇→ 70％乙醇，0～4℃，每步5～10min； 8 保存 70％乙醇0～4℃保存。 （五）实验要求 1 用具干燥； 2 取材 快、准、小、轻； 3 鋨酸有毒，需在通风厨中进行，含鋨酸的废液放入指定容器； 4 每人固定2～3块样品； 5 在固定的过程中要不断震动样品管。 二、样品的渗透与