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病毒的鸡胚培养;(一)实验目的;(二)实验原理;鸡胚接种技术是养禽业中一种相对新的疫苗接种方法。这种方法就是对孵化后期的鸡胚接种某些活的病毒疫苗。这些病毒疫苗不会对孵化率产生不利的影响,通过这种方式接种疫苗后孵出的雏鸡具有免疫保护力。 ;(三)实验器材;(四)实验方法;鸡胚的模式结构
1.卵壳 2.绒毛尿囊膜 3.尿囊腔
4.羊水腔 5.卵黄囊 6.鸡胚胎 7.卵白;b.病毒材料的准备:要分离培养的病毒材料应是无菌的,因此在处理材料的过程中,应严格按照无菌操作进行,将新城疫弱毒活疫苗按照每1000羽份配成250ml,为达到无菌的目的,可在每毫升接种物中加入青霉素和链霉素各100-5000IU,置室温中1h处理。;法氏囊病毒的分离;2.接种;取10-12日龄的鸡胚,照蛋选择血管较少的部位做一记号,用磨蛋器磨一于纵轴平行的裂痕,小心挑开蛋壳,将白色的壳膜用针尖小心挑破,不要伤及血管丰富而透明的绒毛尿囊膜,在气室顶端钻一小孔,用滴管贴近小孔,轻轻一吸,绒毛尿囊膜便下陷成一小凹。; 取10-12日龄的鸡胚,消毒气室顶上的蛋壳,并将气室顶端的蛋壳锉一三角形的裂痕,用灭菌镊子揭去裂痕部位的蛋壳和壳膜,用灭菌平头镊子刺破尿囊膜,并轻轻夹去羊膜,用小号针头刺进羊膜腔内,注入0.05-0.1ml的病毒接种液,以氧化锌胶布封口,滴上溶化的固体石蜡。放回孵化器,使蛋直立孵化。; 选择6-8日龄的鸡胚,照蛋检查,划出气室和胎位,并以气室向上竖立在蛋托上,气室端的蛋壳经消毒后以打孔器钻一小孔,将注射针头刺过小孔,沿着卵的纵轴刺入约3cm,然后注入0.2ml的病毒接种液,用氧化锌胶布及石蜡封口后放回孵化器中培养。;鸡胚的各种接种途径
1.绒毛尿囊膜接种 2.尿囊腔接种
3.羊水腔接种 4.卵黄囊接种;;4.废料处理;(五)实验作业
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