吸附层析法柱层析法.ppt

第三十章 层析法测定生化物质 层析技术概述 层析技术概述 因其操作简便、高分辨率、高灵敏度、选择性好、样品量少、结果准确等特点 适合于标本含量少,杂质含量多样品分析 尤其适用于生物样品的分离分析 层析技术成为已成为生物化学及分子生物学常用的分析方法，是生命科学、医学实验技术等研究领域必不可少的手段和工具。 三、层析技术原理 层析系统由两相组成： 一是固定相，另一是流动相 流动相：携带流过整个系 　　　　　统的流体 固定相：静止不动的一相 三、层析技术原理 当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，各组分移动速度各异，因而可将各组份分离 若分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，最终达到分离各组分的目的。 四、层析技术分类 四、层析技术分类 吸附层析法(absorption chromatography)：固定相是固体吸附剂，利用各组份在吸附剂表面吸附能力的差别而分离。 分配层析(partition chromatography)：固定相为液体，利用各组份在两液相中的分配系数不同而分离。 离子交换层析(ion exchange chromatography)：是以具有离子交换性能的离子交换剂作固定相，利用他与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物