人类Y染色体长臂异染色质区与鱼类基因组的比较分析CURRENT.pdfVIP

动物学报 　48 ( 1) :135～138 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 人类 Y 染色体长臂异染色质区与 鱼类基因组的比较分析 易梅生　余其兴 　郭一清　刘　利　周荣家 (武汉大学生命科学学院 , 武汉 430072) 关键词 　人类 　Y 染色体 　异染色质 　鱼类基因组 　基因组比较 　荧光原位杂交 　　脊椎动物有一些共同特征 , 这些共有性状都是 斑马鱼、黄鳝、刺鳅以及人类 ( 男性和女性) 在漫长的进化历程中保留下来的 , 因而极具保守 基因组 DNA 分别经超声波打断成 1～2 kb 的片段 性。这种进化上性状的保守性反映了它们的基因组 后 , 用 Biotin11dU TP 标记。另外 , 来自人类 Y 结构存在一定的保守性。人类和硬骨鱼类在进化地 染色体文库的 Y 染色体特异 DNA ( Collins , 1991) 位上相差甚远 , 正因如此 , 它们基因组之间的保守 也用Biotin11dU TP 标记 , 作为杂交探针。 结构才真实代表了脊椎动物进化的最本质特征。因 13 　荧光原位杂交 ( ) ( ) 此 , 以斑马鱼 Dario rerio 和河豚等鱼类模式物 按Jauch 等 1992 的方法加以修改: 去掉杂 种与人类之间直接开展比较基因组研究是近年来的 交体系中的全部封阻 DNA , 杂交混合液不经预杂 国际学术探讨热点之一 ( Amores et al . , 1998 ; 交而直接加到经热变性的染色体上 , 于 37 ℃杂交 Meyer et al . , 1998) 。 16 h 。洗脱后以 avidinFITC 检测 , 信号经 anti 在比较鱼类与人类基因组 , 分析脊椎动物性染 avidin 放大 , 染色体用 PI (propidium iodide) 复染 ( λ ) 色体进化规律的探讨中 , 我们发现鱼类基因组中没 后在荧光显微镜下观察 激发波长 = 455 nm 。 ( ( ) 有与人类 Y 染色体长臂结构异染色质区 Yq11 2 基因组比较原位杂交组合 : a 三种鱼类基因 qter) 的同源序列存在。为了进一步印证和分析这 组 DNA 探针分别对男性染色体组杂交 ; (b) 男性 一现象 , 我们设计了一系列基因组比较原位杂交实 基因组 DNA 探针对三种鱼染色体组杂交 ; (c) 人 验。依据分子杂交体系中重复序列具有优先结合的 类 Y 染色体特异 DNA 探针对三种鱼染色体组杂 特性 , 在适当控制杂交条件的情况下 , 从杂交结果 交 ; ( d) 女性基因组 DNA 探针对男性染色体组杂 对该异染色质区域的特性作了相关分析。 交。 1 　材料和方法 2 　结　果 11 　鱼类染色体和人类染色体制备及 G 分带