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- 2019-06-17 发布于天津
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实验一 血清总补体活性的测定 ——CH50法 实验目的要求 1.掌握补体的溶细胞作用; 2.了解血清总补体活性测定的方法及实际意义。 * MBL 复习理论知识 参与非特异性免疫的 效应阶段,感染早期 发挥作用 参与非特异性免疫的 效应阶段,感染早期 发挥作用 参与特异性免疫的 效应阶段,感染后期 发挥作用 生物学作用 C4b2a3b C3bnBb C4b2a3b C5转化酶 C4b2a C3bBb C4b2a C3转化酶 Ca2+ Mg2+ Ca2+、Mg2+ 所需离子 C2-C9、MASP C3、C5-C9、B因子、D因子 C1、C4、C2、C3、C5-C9 参与补体成分 MBL、丝氨酸蛋白酶 C4、C2 C3 C1q 起始分子 甘露糖残基等 肽聚糖、酵母多糖、脂多糖 抗原抗体复合物 激活物质 MBL途径 替代激活途径 经典激活途径 绵羊红细胞(sheep red blood cell, SRBC)与其相应的抗体(溶血素)结合形成抗原-抗体复合物,经经典途径活化补体系统,使绵羊红细胞溶解。当溶血素和绵羊红细胞浓度恒定时,溶血程度与补体含量和活性相关。将新鲜待检血清作不同稀释后,加入反应体系,测定溶血程度,以50%溶血时的最小血清用量作为判定终点,可测知补体总溶血活性。 (一)CH50测定法的原理 溶血程度与补体含量的关系 在适当、稳定的反应系统中,溶血反应与补体的剂量依赖关
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