原子力显微镜技术检测几种骨组织细胞力学性能.pdf

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(5): 644–649 DOI: 10.11844/cjcb.2014.05.0413 原子力显微镜技术检测几种骨组织细胞力学性能 王 哲 郝峰涛 杨周岐 陈晓虎 商 澎* (西北工业大学生命学院, 西北工业大学特殊环境生物物理学研究所, 空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室, 西安 710072) 摘要 为了探究几种骨组织细胞系的力学性能及其与细胞功能的关系, 该文采用原子力显 微镜压陷法分别检测了前成骨细胞系(2T3和MC3T3-E1) 、前骨细胞系(MLO-A5)和骨样细胞系 (MLO-Y4)的杨氏模量, 利用激光共聚焦显微镜观察了这几种细胞微丝和微管的排布。结果显示, 2T3 、MC3T3-E1 、MLO-A5和MLO-Y4细胞的杨氏模量分别为(7 000±2 015) Pa 、(6 600±2 024) Pa 、 (4 700± 1 644) Pa和(4 500± 1 622) Pa, 与原代骨组织细胞的杨氏模量及变化趋势保持一致, 但两种前 成骨细胞的杨氏模量要显著高于前骨细胞和骨细胞。细胞荧光染色结果表明, 前成骨细胞细胞核 周围的微丝和微管分布密度要高于前骨细胞和骨细胞, 而前骨细胞MLO-A5, 尤其是骨细胞MLO- Y4 的骨架主要集中于细胞突触和边缘, 这可能是导致几种细胞力学性能差异的原因。该研究从生 物力学的角度为进一步深入理解骨组织细胞结构与功能的关系提供了实验依据。 关键词 原子力显微镜; 力学性能; 杨氏模量; 成骨细胞; 骨细胞 Investigation of Mechanical Property of Various Bone Cell Lines by Atomic Force Microscopy Wang Zhe, Hao Fengtao, Yang Zhouqi, Chen Xiaohu, Shang Peng * (Key Laboratory for Space Biosciences and Biotechnology, Institute of Special Environmental Biophysics, School of Life Sciences, Northwestern Polytechnical University, Xi’an 710072, China) Abstract In order to investigate the mechanical property of various bone cell lines and its relation with cell function, atomic force microscopy (AFM) was used to probe the Young’s modulus of pre-osteoblast (2T3 and MC3T3-E1), pre-osteocyte (MLO-A5) and osteocyte (MLO-Y4). The fluorescent images of cell cytoskeleton such as F-actin and microtubule were detected by laser confocal microscopy. The results demonstrated that the Young’s modulus of 2T3, MC3T3-E1, MLO-A5 and MLO-Y4 cell lines were (7 000±2 015) Pa, (6 600±2 024) Pa, (4 700± 1 644) Pa and (4 500± 1 622) Pa, respectively. Interestingly, the Young’s modulus of pro-oste