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NaF对RAW264.7细胞活力的影响探究 全身暴露于过量氟(F)可导致骨稳态和牙釉质的发 展受到干扰，过量氟引起的骨病变中，破骨性吸收占相当重 要的位置，虽然过度破骨性吸收是氟骨症致残的一个重要因 素，但对破骨细胞的活动研究很少。2012年我们采用小鼠 破骨细胞前体细胞构建体外破骨细胞染氟模型，观察破骨 细胞染氟过程中的细胞增殖和分泌特异产物基质金属蛋白 酶 9 (ma?trix metalloproteinase-9? MMP-9)和组织蛋白酶 K(ca-thepsin K)表达的影响。 1材料与方法 破骨细胞前体细胞 的培养 小鼠单核巨噬细胞白 血病细胞RAW (购自中国科学院细胞库)，用含10%胎牛血 清的达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbeccos modified Eagles medium, DMEM, Gibco,美国)培养液于 37°C、5% CO 培 养箱中培养。每3天换液一次，细胞增殖至对数生长期后, 用％胰蛋白酶室温消化后计数备用。MMP-9和组织蛋白酶K 纯化多克隆抗体购于北京博奥森公司。 破骨细胞的诱导分化及鉴定①抗酒石酸酸性磷酸 酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色：细胞以 2103个/孔接种于24孔板，培养24 h后用含终质量浓度为 50 g/L RANKL和50 g/L小鼠重组巨噬细胞集落刺