Cathepsin+L活性对胶质瘤干细胞放射增敏的分析.pdfVIP

序 言 脑恶性胶质瘤是最常见的成人颅内原发恶性肿瘤，占颅内肿瘤的45 ％至50 ％。脑 胶质瘤恶性程度高，侵袭性强，与周围脑组织无明显的界限，呈侵润性生长，而且解 剖位置特殊，手术往往无法彻底切除，术后复发几率很高，平均生存期不到一年，需 结合放、化疗、生物治疗等辅助治疗手段延长病人生存期。由于脑胶质瘤本身对抗癌 药物耐药性很高，目前化疗的临床有效率很低，于是放射治疗成为脑胶质瘤综合治疗 最重要的治疗手段之一，放疗可以进一步杀灭手术不能彻底切除而残留的肿瘤，延长 病人的生存时间。但是相当一部分患者接受放射治疗中或治疗后肿瘤出现复发，疗效 并不理想。 2001年Reyal[1]提出了肿瘤干细胞学说，后来的很多研究表明多种类型的胶质瘤 组织中存在少数具有自我更新、多向分化、较强增殖潜能的细胞——胶质瘤干细胞 (glioma stern cells，GSCs) 。目前看来，GSCs主要有5个特征：（1）自我更新；（2 ）分 [2] 化潜能；（3 ）高致瘤性；（4 ）耐药性；（5 ）放射抗拒性：Bao 的研究 发现非GSCs在 常规剂量的放疗下易被杀灭，而GSCs 因具有高度的辐射抗性得以生存，因此，普遍 认为临床上恶性脑胶质瘤放射治疗失败与GSCs 的辐射抗性有关。 1.GSCs的辐射抗性 影响肿瘤放射治疗有诸多因素，其中肿瘤内在的放射敏感性起着决定性作用。放 射可以引起细胞凋亡、细胞周期变化、基因突变、DNA损伤和损伤修复等，都与肿 瘤的内在放射敏感性密切相关。放射治疗的作用方式主要是通过损伤细胞DNA, 影响 细胞增殖, 以及细胞周期等, 最终导致细胞的凋亡或者死亡。 研究表明放射对生物大分子的破坏主要是引起细胞凋亡。但是在电离放射通过 DNA损伤而引起细胞凋亡的信号传导途径研究中发现，超过一半的恶性胶质瘤中发 生p53 的突变，以及抗凋亡蛋白如Bcl-2等的过度表达，对以诱导凋亡为手段的疗法产 生了抵抗[2] 。因此研究辐射抗性的作用机制对临床放射治疗意义重大。 目前肿瘤干细胞的抗放射机制有以下几个方面：（1）DNA损伤关卡的激活[6] 。 [7] [2] DNA是放射损伤的重要靶分子 ，Bao 等利用免疫印迹检测X射线放疗1h前后细胞毛 细血管扩张性共济失调突变基因(ataxia telangiectasia mutated，ATM) 、Rad17 、检测点 1 激酶1、2(checkpoint kinase 1 、2 ，CHK1、CHK2)等DNA损伤关卡蛋白的磷酸化反应， 结果表明CD133阳性细胞上述蛋白磷酸化水平明显高于CD133 阴性细胞．提出CD133 阳性细胞能通过比其他肿瘤细胞更有效地激活DNA损伤关卡，诱导细胞周期阻滞， 让放射损伤的DNA得以修复[8] [9] 。（2 ）细胞增殖传导信号通路的活化。Kang等 研究发 现CD133 阳性GSCs经放射后可以通过活化Erk1 ／2和Akt增殖信号通路促进细胞增殖 而逃避凋亡。（3 ）低氧环境。射线损伤DNA有两种途径：一种可直接使细胞染色体 DNA分子链断裂：另一种是在细胞内和另一个原子或分子相互作用产生氢氧自由基 再与DNA分子链作用，这种损伤在电离放射过程中需要有氧的存在，如果没有氧， 有机过氧化物自由基就不能产生，从而降低了对DNA 的损伤。Horiuchi等[10]研究认为 低氧可导致cyclin D1表达减少，引起G0/Gl期阻滞；并且低氧环境可促进干细胞的维 持，并阻止干细胞的分化[11-12] 。因此低氧可间接促进干细胞的辐射抗性。（4 ）细胞周 期的影响。放疗主要作用于进入增殖期的肿瘤细胞，直接或间接作用引起DNA损伤 导致细胞的死亡或凋亡，特别是处于G2/M期的细胞对电离放射最为敏感，而根据干 细胞理论．绝大部分干细胞停滞在G0期，放疗无法杀灭。 其中细胞的DNA损伤关卡及周期调控在细胞放射