第十八章补体检测及补体参与的试验临床免疫室黄卓春.ppt

免疫浊度测定（第六章 P67） 可溶性抗原和相应抗体特异性结合（两者在比例合适和增浊剂作用下），可快速形成较大的免疫复合物，使反应液出现浊度。 抗体过量的情况下，反应液的浊度与待测抗原量呈正相关 透射免疫比浊试验 检测的是透射光，即免疫复合物形成后，反应液浊度变化，引起透射光的改变 抗体用量大，耗时长，不宜用于药物半抗原的检测 散射免疫比浊试验 检测的是散射光 终点散射比浊试验——在抗原-抗体反应达到平衡时测定散射光强度 速率散射比浊试验——抗原抗体结合反应的动力学测定方法，临床上使用的主要方法学 胶乳增强免疫浊度测定 利用补体的溶细胞作用，将其作为试剂成分参与试验 可对各种抗原或抗体以及免疫复合物进行检测 第四节 补体参与的试验 补体结合试验 complement fixation test, CFT 反映经典途径的抗原抗体反应 应用绵羊红细胞和溶血素作指示剂 检测抗原或抗体 一、试验原理 补体结合试验三个系统 反应系统：已知抗原（或抗体）与待测抗体（或抗原） 补体系统：豚鼠血清 指示系统：与溶血素结合的致敏绵羊红细胞SRBCS 图19-3 二、方法评价 灵敏度高 0.05ug/ml 特异性强 结果明显 试验条件要求低 参与成分多，操作繁琐 补体参与的其他试验 C1q抗体的测定试验 将C1q作为抗原检测患者血清中的抗C1q抗体 抗C1q抗体是一种自身抗体，临床上主要用于狼疮肾炎的诊断和监测，低补体血症性荨麻疹性血管炎、膜增生性肾小球肾炎和Felty综合征（指除有典型的类风湿关节炎临床表现外，还伴有脾脏肿大和白细胞计数减少的一种严重型类风湿关节炎）的诊断 采用ELISA方法检测 1. 与补体降低相关的疾病 2. 高补体血症(心梗和某些恶性肿瘤) 第五节 补体测定的临床意义 补体缺陷 在临床上偶尔可以见到一些补体先天性缺陷的病人，C2缺陷和C1INH缺陷相对较常见，其它补体成分的缺陷均非常罕见。 补体先天性缺陷患者的两大临床表现是反复感染和自身免疫病，这也从反面证实了补体在抗感染免疫和免疫调节方面的重要意义。 补体缺陷的临床表现 临床表现 主要相关的缺陷补体成分 次要相关的缺陷补体成分 遗传性血管神经性水肿 C1INH 严重顽固性皮肤损害 C1q 反复发作性细菌感染 C3，I因子 C1r，C1q 免疫复合物性血管炎（包括肾炎） C1q，C1r，C4，C2 C3，C5 反复发作性革兰氏阳性球菌感染 C5，C6，C7，C8 系统性红斑狼疮 CR1 C1IHN缺陷引起血管神经性水肿 继发性补体降低： 消耗增多：SLE、RA、自身免疫性溶血 大量丢失：大面积烧伤、失血及肾脏病患者 补体合成不足：肝脏疾病或营养不良 补体活性及含量的测定对自身免疫病的诊断、有无疾病的活动以及疾病的进程和疗效的判断等提供重要依据 高补体血症 偶见感染恢复期 恶性肿瘤 急性病毒性肝炎、心肌梗死、糖尿病 补体与病毒感染 补体受体及补体膜表面调节蛋白与病毒感染的关联受到越来越多的重视，一些病毒可通过补体受体等感染宿主细胞，例如，EB病毒通过CR2感染B细胞，麻疹病毒通过MCP感染机体细胞，柯萨其病毒、埃可病毒和肠道病毒可通过DAF感染细胞等。 临床上可考虑应用补体受体的阻断剂治疗某些病毒感染性疾病。 补体与器官移植的超急性排斥 目前研究结果表明，超急性移植排斥的主要原因是补体系统的全身性激活，导致对机体自身的广泛性组织损伤，产生致命的后果。 目前在临床前研究的解决方案是： （1）利用补体抑制剂如可溶性CR1进行药物治疗； （2）考虑应用转基因技术解决这一问题。 目前已开展了CR1、DAF、CD59、MCP等膜表面补体调节蛋白转基因猪的实验研究，将这些人类基因在胚胎期转入猪胚胎细胞后，使其发育成含有人类基因的转基因猪，将其器官移植至灵长类动物后，由于补体调节蛋白对补体的抑制作用，可有效阻止超急性移植排斥的发生，使移植的器官存活时间明显延长。 补体与炎症性疾病 补体在活化过程中产生的片段具有一些新的生物学活性，其中C5a，C3a，C4a具有过敏毒素效应，C5a具有趋化活性，这些片段在促进炎症反应中起重要作用，因而在一些炎症相关的疾病中，补体起重要的病理作用，包括自身免疫病、心血管疾病、感染过程中的炎症性组织损伤、超急性移植排斥等。 通过抑制补体有可能收到治疗疾病的效果 补体测定的应用 诊断病原体感染 检测补体的功能 CH50 检测单个成分的含量及活性 C3、C4、PFB 免疫性疾病 相关疾病时补体的检测 与补体相关的遗传性疾病