第三章 紫外-可见分光光度法（Ultraviolet and Visible.pptVIP

3）被测溶液不均匀导致的偏离 朗伯—比尔定律要求吸光物质的溶液是均匀的 使 I0‘ = Ia + It 如果被测溶液不均匀，是胶体溶液、乳浊液或悬浮液时 I0‘ = Ia + Ir + It （散射） 测得的吸光度比实际的吸光度增加，标淮曲线偏离直线向吸光度轴弯曲。 4）由于溶液自身的化学反应导致的偏离 原因： 溶液对光的吸收程度决定于吸光物质自身的性质和数目，溶液中的吸光物质的化学变化导致偏离朗伯—比尔定律。 化学作用： 解离：改变酸度，导致有机酸碱分布系数的改变。 络合：多级络合导致产生不同络合比的络合物，或络合物分解。 缔合：Cr2O72-+H2O===2HCrO4-==2CrO42-+2H+ （橙色） （黄色） 2. 仪器因素 仪器因素包括光源稳定性以及入射光的单色性等。 a）入射光的非单色性：不同光对所产生的吸收不同，可导致测定偏差。 假设入射光由测量波长?x和干扰?i波长组成，据Beer定律，溶液对在?x和?i 的光的吸光度分别为： 综合前两式，得 ? 当?x=?i时，或者说当?x=?i时，有A=?xbc, 符合L-B定律； ? 当?x??i时，或者说当?x??i时，则吸光度与浓度是非线性的。二者差别越大，则偏离L-B越大； ? 当?x?i，测得的吸光度比在“单色光” ?x处测得的低，产生负偏离；反之，当 ?x?i，则产生正偏离。 b）谱带宽度与狭缝宽度：“单色光”仅是理想情况，经分光元件色散所得的“单色光”实际上是有一定波长范围的光谱带(即谱带宽度)。单色光的“纯度”与狭缝宽度有关，狭缝越窄，它所包含的波长范围越小，单色性越好。 仪器因素的影响即可以产生正偏离也可以产生负偏离 仪器因素的影响随样品浓度的增大显著加大。 消除方法： 提高仪器的单色性 选择被测物的?MAX平坦处作为测量波长 减小谱带宽度与狭缝宽度 第三章 紫外-可见分光光度法 (Ultraviolet and Visible Spectrophotometry, UV-Vis) ? 3.1 紫外-可见吸收光谱 3.2 吸收光谱的测量-----Lambert-Beer 定律 3.3 紫外-可见光度计仪器组成 3.4 分析条件选择 3.5 UV-Vis分光光度法的应用 UV-Vis方法是分子光谱方法，它利用分子对外来辐射的选择性吸收特性。 UV-Vis涉及分子外层电子的能级跃迁；光谱区在200~800nm. UV-Vis主要用于分子的定量分析，但紫外光谱(UV)为四大波谱之一，是鉴定 许多化合物，尤其是有机化合物的重要定性工具之一。 3.1 紫外-可见吸收光谱 利用物质的分子或离子对某一波长范围的吸收作用，对物质进行定性、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 按吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法。 ?-胡罗卜素 3.1.1 分子吸收光谱的形成 （1）为什么分子光谱是带状光谱 （2）为什么紫外-可见光谱的吸收波长在200-800nm （3）为什么紫外-可见光谱可用于定性和定量分析 电子能级间隔比振动能级和转动能级间隔大1~2个数量级，在发生电子能级跃迁时，伴有振-转能级的跃迁，形成所谓的带状光谱。 分子的能量变化?E为各种形式能量变化的总和： （1）分子吸收光谱的形成 （2）紫外-可见光谱的波长范围：200-800 nm. （1） 转动能级间的能量差ΔΕr：0.005～0.050eV，跃迁产生吸收光谱位于远红外区（50-100um)。远红外光谱(或分子转动光谱) （2） 振动能级的能量差ΔΕv约为：0.05～１eV，跃迁产生的吸收光谱位于红外区(800-5000nm)，红外光谱(或分子振动光谱) （3） 电子能级的能量差ΔΕe较大1～20eV。电子跃迁产生的吸收光谱在紫外(200-400nm)—可见光区(400-800nm)，紫外—可见光谱(或分子的电子光谱) 紫外-可见吸收光谱的吸收曲线 （3）紫外-可见光谱用于定性和定量分析 紫外-可见吸收光谱的吸收曲线特点 ① 同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax ② 不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同 ③ 不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异。 紫外-可见光谱用于定性分析 不同物质结构不同或者说其分子能级的能量(各种能级能量总和)或能量间隔各异，因此不同物质将选择性地吸收不同波长或能量的外来