实用血培养厌氧菌分离鉴定及药敏试验方.docVIP

实用厌氧菌分离鉴定及药敏试验方法 临床重要的厌氧菌(主要是内源性)主要是拟杆菌科（G-b）和厌氧球菌。血培养阳性厌氧菌主要有拟杆菌属、梭杆菌属、、普雷沃菌属、卟啉单胞菌属、消化链球菌属及其他厌氧菌。 一、必需的设备 厌氧罐、厌氧盒、厌氧袋（标本少） 厌氧发生气袋 厌氧指示剂 二、培养基的准备 非选择厌氧血平板 布氏血平板 脑心浸液琼脂 CDC厌氧血琼脂 哥伦比亚血琼脂 新鲜配制或经24h预还原（厌氧环境放置）！！！ 特殊成份（降低氧还电势）: L-半胱氨酸、氯化血红素(Hemin)、VitK1 选择性厌氧血平板：自制、商商品化 三、 厌氧血培养瓶报警后 步骤一：转种 转种（四区划线） 需氧 厌氧 血平板、巧克力平板，5％CO2 还原后的厌氧血平板 24h检查 生长，G染色，分离，鉴定 —— 48h 检查 原始平板是否有新菌落出现 打开 步骤二：耐氧试验确认厌氧菌 培养48h后可能有以下几种情况 需氧 厌氧 血平板 巧克力平板 处理方法 厌氧血平板 处理方法 情况一 + + 常规 + 耐氧试验、G染色 再培养48h 情况二 — + 可能流感杆菌 + 情况三 — — + G染色，厌氧菌 情况一和二：耐氧试验24-48h再观察结果，有确认厌氧菌的菌落按下边鉴定步骤。 耐氧试验方法：选择每种形态的单菌落，转种一个厌氧血平皿和巧克力平皿，分别培养。 情况