沪科版生命科学高二上7-5《克隆技术》.pptVIP

沪科版生命科学高二上7-5《克隆技术》.ppt

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[特别提醒] (1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶,第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞,第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)原代培养与传代培养的分界点为分瓶培养时。 (3)动物细胞核移植的几个问题 ①动物细胞核移植的分类:哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。 ②细胞核移植选用去核卵(母)细胞的原因:虽然细胞核内具有发展成为一个完整个体所需的全套基因,但动物体细胞分化程度较高,因此很难表达全能性。而卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞的细胞质多,营养丰富,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植入去核卵(母)细胞内,既保证了重组细胞的完整性,又能刺激体细胞核表达其全能性,发育成为一个新的个体。 ③与克隆动物有关的亲本的遗传关系:动物体细胞核移植产生的新个体的亲本有三个:体细胞核供体、卵(母)细胞细胞质供体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一样,因此新个体的性状与体细胞核供体基本相同。卵(母)细胞细胞质中也有少量的DNA,新个体性状与卵(母)细胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个体提供遗传物质,新个体性状与代孕母体基本没有联系。 2.某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。 (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于条件适宜且相同的培养瓶中培养。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量 ________。 (2)细胞培养应在含有5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是________。 (3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的________。 (4)已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关,要探究一种抗癌药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分成A、B两组,A组细胞培养液中加入药物Y,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,培养一段时间后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的________或________合成水平的差异,确定Y的药效。 解析:肿瘤细胞具无限增殖能力,繁殖快。动物细胞培养液中CO2的作用是维持培养液的pH。加入适量抗生素可抑制细菌的污染。 答案:(1)多 (2)维持培养液的pH (3)抗生素 (4)mRNA 相关蛋白质 植物组织培养 [例1] 下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是(  ) A.利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B.①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C.多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D.此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 [听课记录] 植物的组织培养过程是无性繁殖的过程,如果离体的组织是纯合子,将来得到的试管苗是纯合子,如果离体的组织是杂合子,将来得到的试管苗是杂合子;①为脱分化,②为再分化,脱分化过程没有细胞的分化;用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗培养就可获得多倍体植株,不需经过组织培养过程;植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性而不是细胞膜的流动性。 [答案] A [例2] 用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是(  ) A.都需要用CO2培养箱 B.都需要用液体培养基 C.都要在无菌条件下进行 D.都可体现细胞的全能性 [听课记录] 不管是动物细胞培养还是植物组织培养,最基本的一个外界条件就是都要在无菌环境条件下进行。此外,动物细胞培养的培养基是液体培养基,其中的碳源是葡萄糖,培养液中还需要加入一定的动物血清或血浆,其气体环境是95%空气+5%的二氧化碳,以维持培养液的pH;而植物组织培养的培养基为固体培养基,其碳源为蔗糖,在组织培养的脱分化阶段必须在黑暗条件下进行,而再分化过程需要一定的光照条件;动物细胞培养就是细胞的增殖,不能体现细胞的全能性,而植物组织培养体现了植物细胞的全能性。 [答案] C (1)植物组织培养的目的不同,则培养阶段不同:若培 育人工种子,则培养到胚状体阶段;若提取细胞产品, 则一般培养到愈伤组织阶段;若培育新个体,则应培育 到试管苗阶段。 (2)动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别是动物细胞 可以传代培养,而植物细胞不能。 [例3] 回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_______时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是________。 (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现________的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发

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