罂粟碱那可丁和蒂巴因的测定.doc

—— PAGE 2 — — PAGE 1 —— 附件1 食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁 和蒂巴因的测定 BJS 201802 1 范围 本方法规定了食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于固体食品（香辛料、调味粉、固态火锅底料、鸡精等固体复合调味料、肉制品等）、半固体食品（沙茶酱、辣椒酱等酱料、半固体麻辣烫底料、半固体火锅底料、其他半固体复合调味料）和液体食品（调味油、辣椒油等液体调味料、火锅汤料、麻辣烫汤料、其他食用汤料）中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的定量测定。 2 原理 样品用水或盐酸溶液分散均匀，用乙腈提取后，经盐析处理，离心，取上清液用液相色谱-串联质谱仪检测。吗啡和可待因用内标法定量，罂粟碱、那可丁和蒂巴因用外标法定量。 3 试剂与材料 除另有规定外，本方法中所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。 3.1.2乙腈（CH3CN）：色谱纯。 3.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。 3.1.4盐酸（HCl）。 3.1.5甲酸铵（HCOONH4）：色谱纯。 3.1.6无水醋酸钠（CH3COONa）。 3.1.7无水硫酸镁（MgSO4）。 3.2 试剂配制 3.2.1盐酸溶液（0.1 mol/L）：量取盐酸（3.1.4）9 mL，加水至1000 mL，摇匀备用。 3.2.2甲酸铵溶液（10 mmol/L）：称取甲酸铵（3.1.5）0.63 g（精确至0.01 g），加少量水溶解后，定容至1000 mL，混匀后备用。 3.2.3甲酸甲醇溶液（0.5%）：准确吸取甲酸（3.1.3）0.5 mL，置于100 mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀备用。 3.2.4甲酸乙腈溶液（0.1%）：量取甲酸（3.1.3）1 mL，用乙腈（3.1.2）稀释至1000 mL，摇匀，过滤。 3.2.5含0.1 %甲酸的10 mmol/L甲酸铵溶液：量取甲酸（3.1.3）1 mL，加甲酸铵溶液（3.2.2）稀释并定容至1000 mL，摇匀，过滤。 3.3 标准品 3.3.1罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因标准品：纯度不低于98%。中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量详见表1。 表1 标准品基本信息 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子量 罂粟碱 Papaverine 58-74-2 C20H21NO4 339.38 吗啡 Morphine 57-27-2 C17H19NO3 285.34 那可丁 Noscapine 128-62-1 C22H23NO7 413.42 可待因 Codeine 76-57-3 C18H21NO3 299.36 蒂巴因 Thebaine \o 166615 115-37-7 C19H21NO3 311.37 3.3.2吗啡-D3同位素溶液（C17H16D3NO3）：浓度为1.0 mg/mL。﹣18℃密封避光保存，有效期1年。 3.3.3可待因-D3同位素溶液（C18H18 D3NO3）：浓度1.0 mg/mL。﹣18℃密封避光保存，有效期1年。 3.4 标准溶液配制 3.4.1标准储备液（1.0 mg/mL）：分别精密称取罂粟碱、那可丁、蒂巴因、吗啡和可待因标准品各10 mg（精确至0.01mg）至小烧杯中，加少量甲酸甲醇溶液（3.2.3）溶解，溶液定量移入10 mL容量瓶中，用甲酸甲醇溶液（3.2.3）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度均为1.0 mg/mL的标准储备液。此溶液密封后﹣18℃避光保存，有效期 1年。 3.4.2混合标准中间溶液（1）：准确吸取浓度为1.0 mg/mL的罂粟碱、那可丁、蒂巴因标准储备液（3.4.1）各100 μL和浓度为1.0 mg/mL的吗啡、可待因标准储备溶液（3.4.1）各5 mL于同一个100 mL容量瓶中，用乙腈（3.1.2）定容至刻度，摇匀，即得含罂粟碱、那可丁、蒂巴因浓度为1.0 μg/mL和吗啡、可待因浓度为50 μg/mL的混合标准品溶液。此溶液密封后4℃避光保存，有效期 6个月。 3.4.3混合标准中间溶液（2）：准确吸取混合标准中间溶液（1）（3.4.2）1.0 mL于10 mL容量瓶中，用乙腈（3.1.2）定容至刻度，摇匀，即得含罂粟碱、那可丁、蒂巴因浓度为0.10 μg/mL和吗啡、可待因浓度为5.0 μg/mL的混合标准品溶液。此溶液密封后4℃避光保存，有效期 6个月。 3.4.4同位素内标工作溶液（5.0 μg/mL）：分别精密吸取吗啡-D3同位素溶液（3.3.2）和可待因-D3同位素溶液（3.3.3）各1.0 mL，置200 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成吗啡-D3、可