- 1、本文档共56页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 金黄色葡萄球菌的鉴定 血浆凝固酶试验 金黄色葡萄球菌的鉴定 血浆凝固酶试验 分离培养:十六烷三甲基溴化铵培养基 生化反应: 氧化酶试验(+) (培养物呈粉红色渐变为紫红色) 绿脓菌素试验(+) (盐酸溶液呈粉红色) 铜绿假单胞菌的鉴定 铜绿假单胞菌的鉴定 铜绿假单胞菌 溴化十六烷基三甲铵琼脂 菌种的相关知识 菌种是一个国家的重要资源,世界各国对菌种的保藏都极为重视。世界上有700多家菌菌种保藏机构,其中国际知识产权组织承认的法定的保藏机构仅有28家。 1、我国的微生物菌种保藏机构 1)普通微生物菌种保藏管理中心(CCGMC) 中科院微生物所,北京, 中科院武汉病毒研究所 2)农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC) 中国农业科学院土壤肥料研究所,北京 (ISF) 3)工业微生物菌种保藏管理中心(CICC) 中国食品发酵工业科学研究院,北京,(IFFI) 4)医学微生物菌种保藏管理中心(CMCC) 中国医学科学院皮肤病研究所,南京 卫生部药品生物制品检定所,北京 中国医学科学院病毒研究所 5)抗生素菌种保藏管理中心(CACC) 中国医学科学学院抗生素研究所,北京 四川抗生素工业研究所,成都 华北制药厂抗生素研究所,石家庄 6)兽医微生物菌种保藏管理中心(CVCC) 农业部兽医药品检察所,北京 2、国外主要的微生物菌种保藏机构 1)美国标准菌种收藏所(ATCC) 2)美国冷泉港研究所(CSH) 3)日本东京大学应用微生物研究所(IAM) 4)日本东京科研化学有限公司(KCC) 5)日本大阪发酵研究所(IFO) 6)英国国立标准菌种收藏所(NCTC) 7)美国国立卫生研究所(NIH) 8)美国农业部北方开发利用研究部(NRRL) 我国的标准菌种统一由中国菌种保藏管理委员会(CCCCM)管理,涉及药品微生物检验的菌种由医学微生物菌种保藏管理中心(CMCC)提供 美国ATCC、NRRL,荷兰的CBS 中国医学菌种保藏中心提供的标准菌株 美国国家菌种保藏中心提供的标准菌株 菌种的采购 菌种的复苏 菌种的传代 菌种的使用 菌种的保藏 菌种的销毁 菌种的采购 向指定的菌种保藏机构购置。 所购菌种均为冷冻干燥菌种。 购入菌种后,应及时移交实验室。实验室菌种 管理人员应仔细核对菌种发放单和冷冻干燥菌种 管标签等各项信息,确认无误后,置4~6℃暂存。 菌种的复苏 菌种在打开前应仔细核对标签上菌名、菌号。 并注意一株菌种使用一套打开用具,严防交叉污染。 菌种复苏应在生物安全柜内操作。 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、可同时接种液体培养基和琼脂培养基斜面。 取琼脂培养基斜面上的菌苔按要求对菌种的纯度进行鉴定。 菌种的复苏 干燥菌种(安瓿)的开启 菌种的传代 应在生物安全柜中进行菌种的传代 。 美国药典(USP)中规定:“将微生物接种至一新鲜培养基上/内,每萌发一次即称为一代,”并规定“菌种的传代次数(自原始菌种冻干粉起)不得超过5代”。 我国的GMP认证中也如此要求,并且中国药典2005年版药典也已做出“菌种的传代次数(自原始菌种冻干粉起)不得超过5代”这个明确的规定。 常用的传代方法 斜面接种 划线接种 液体接种 穿刺接种 菌种的传代 斜面接种时的无菌操作 微生物的环境器皿及培养基的无菌 操作者的外界环境及操作过程的无菌(环境及操作的无菌) 划线接种 平板划线法(streak plate method) 菌种的使用 菌液的制备: 取铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中,置35~37℃细菌培养箱培养18 ~24h。 取上述液体培养物1ml,加入9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中,分别10倍稀释至10-5~10-9,制成含菌数小100cfu/ml的溶液,备用。 菌悬液制备后应在2小时内使用,若保存在2~8℃的菌悬液可以在24小时内使用。 菌种的使用 铜绿假单胞菌相关: 因铜绿假单胞菌有运动性,因此在半固体培养基中穿刺培养后无法形成穿刺线。接种时,将半固体取出直接在培养基上涂布即可。 斜面保藏的菌种在冰箱中放置应注意控制温度,一般不宜低于4℃,也可以放置在室温中,但应控制温度不超过25 ℃。菌种保存过程中,会存在色素退化 的情况,此时对菌种进行传代培养,即可重新表现出色素,仍可使用。 菌种的保藏 保藏的方法:
文档评论(0)