生活饮用水中丙烯酰胺的测定-高效液相色谱串联质谱法.DOC

ICS FORMTEXT 点击此处添加ICS号 FORMTEXT 点击此处添加中国标准文献分类号 中华人民共和国国家标准 GB/T FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT FORMTEXT 生活饮用水中丙烯酰胺的测定—高效液相色谱串联质谱法 FORMTEXT Determination of acrylamide in drinking water—High performance liquid chromatography tandem mass spectrometry FORMTEXT 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 FORMDROPDOWN FORMTEXT （本稿完成日期：2017-03-06 FORMTEXT FORMTEXT XX FORMTEXT XX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 GB/T XXXXX—XXXX PAGE I 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会提出并归口。 本标准起草单位：湖南省疾病预防控制中心。 本标准参与起草单位：重庆市疾病预防控制中心、武汉市疾病预防控制中心、长春市疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：冯家力、曾栋、陈东洋、李帮锐、王一红、张昊、王正虹、周倩如、唐晓琴、何振宇、徐立、肖永华、刘正丹、李 琛、陈悦鸣。 生活饮用水中丙烯酰胺的测定—高效液相色谱串联质谱法 范围 本标准规定了用高效液相色谱串联质谱法测定生活饮用水中的丙烯酰胺。 本标准适用于生活饮用水中丙烯酰胺含量的测定。若取100 mL水样浓缩至1.0 mL测定，方法的检出限为0.005 μg/L，定量限为0.020 μg/L。 原理 水样经滤膜过滤后，经活性炭固相萃取柱富集，甲醇洗脱，洗脱液用氮气吹至近干后用水溶解，供液相色谱串联质谱仪进行检测，同位素内标法定量。 试剂与材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 甲醇：色谱纯。 标准物质：丙烯酰胺（纯度≥99 %），13C3-丙烯酰胺内标溶液（1.0 mg/mL）。 活性炭固相萃取柱：称取500 mg活性炭（200目）于装有筛板的10 mL空柱管中，填料上端再以筛板固定，轻轻压实。也可使用商品化活性炭固相萃取柱（500 mg，6 mL)。以5μg/L的水样100 mL过固相萃取柱，回收率应≥90 %。 仪器与设备 高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾电离源。 氮吹仪。 涡旋混合器。 固相萃取装置。 微孔滤膜：0.45 μm和0.22 μm水相滤膜。 天平：感量为0.00001 g。 样品 样品的采集及保存 用棕色磨口玻璃瓶采集样品，采样前用待测水样将样品瓶清洗2～3次。采样后，水样应充满样品瓶并加盖密封，置于冰箱内冷藏避光保存。 过滤 将样品过0.45 μm水相滤膜。 固相萃取 活化：每一个活性炭固相萃取柱分别用5 mL甲醇，5 mL纯水活化，活化时，不要让甲醇和水流干（液面不低于吸附剂顶部）。 吸附：取预过滤后的100 mL水样，加入50 μL浓度为100 μg/L内标工作液，混匀，内标物在水中的浓度为0.050 μg/L，水样以约5 mL/min速度通过固相萃取柱。 干燥：用氮气吹干固相萃取柱。 洗脱：用10 mL甲醇洗脱。 样品浓缩 洗脱液在40℃左右氮气吹至近干，用1.0 mL纯水溶解，过0.22 μm水相滤膜。 分析步骤 仪器参数 液相色谱参考条件 色谱柱：极性改性C18色谱柱（150 mm×2.1 mm, 3.5 μm）或相当色谱柱。 流动相：甲醇+水=10+90（v/v）。 流速：0.2 mL/min。 柱温： 25 ℃。 质谱参考条件 离子源：阳离子电喷雾电离源（ESI+）。 检测方式：多反应监测（MRM）。 气体：脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气，使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求。 电压：毛细管电压、锥孔电压等电压值应优化至最佳灵敏度。 其他：保留时间、母离子、特征子离子及碰撞能量见表1。 丙烯酰胺及其内标物的母离子、特征子离子及保留时间、碰撞能量参考值 名称 保留时间(min) 母离子（m/z） 子离子（m/z） 碰撞能量（eV) 丙烯酰胺 2.20 72 55*/44 10 13C3-丙烯酰胺 2.20 75 58*/45 10 *定量离子 校准 定量分析方法 同位素内标法。 标准溶液 标准溶液的配制 丙烯酰胺标准贮备液：精密称取10 mg丙烯酰胺标准物质于10 mL容量瓶，用甲醇溶解、定容，该溶液浓度为1.0 mg/