黄耆皂苷Ⅳ及丹参酮ⅡA对人类肺癌细胞基因表现的影响-卫生福利部.PDF

中醫藥年報 第 27 期第 2冊 編號〆CCMP95-RD-206 黃耆皂苷 Ⅳ及丹參酮ⅡA 對人類 肺癌細胞 基因表現的影響 蘇進成 佛教 慈濟綜合醫院 摘要 研究目的 〆肺癌是台灣地區癌症死亡原因的第一名。很多肺癌 病 人經常服用中藥黄耆和丹參來輔助治療，但其確切療效，至今仍不完 全清楚。本研究希望利用分子醫學和生物晶片來探討黃耆皂苷 Ⅳ及丹 參酮IIA 對肺癌細胞的影響。 方法〆首先利用MTT 方法檢測不同濃度的黃耆皂苷 Ⅳ和丹參酮 ⅡA ，對肺癌細胞的細胞毒性。接著利用 FACS 檢測對肺癌細胞的細 胞週期效應、粒腺體膜電位、活化氧族群及鈣離子釋放的影響。利用 Western blot檢測引起細胞凋亡、轉移相關信號傳遞蛋白量的改變 。利 用生物晶片檢測作用在肺癌細胞株可能的靶標基因。最後利用動物實 驗 (in vivo) ，檢測丹參酮 ⅡA的肝腎毒性及 對轉殖人類肺癌細胞(H146) 小鼠的治療作用。 結果與討論 〆結果顯示黄蓍皂苷Ⅳ在體外不能抑制人類肺癌細胞 株的增殖及引發細胞凋亡，反而上調轉移相關基因的蛋白表現，利用 生物晶片檢測，並沒有顯著的基因改變。丹參酮 ⅡA 在體外對於人 類肺癌細胞株的增殖，確實有抑制作用，並且有濃度依存效應。也可 增加釋放 ROS 、降低 MMP 和增加 Ca+2 釋放 ，引起A549 、H292 、 H661 細胞凋亡。本研究結果顯示可使肺癌細胞 A549 上調 Cox-2 、 VEGF 、NF- κBp65 、P53 、Cyto- c和 bax 々下調Bcl-2和 P21的蛋白 表現。肺癌細胞 H292 上調 Cox-2 、VEGF 、NF- κBp65 、P53 、P21 、 Cyto- c和 bax 々下調Bcl-2的蛋白表現。肺癌細胞 H661 上調 VEGF 、 NF- κBp65 、Bcl-2和 P53 々下調Cox-2 、Cyto- c 、bax和 P21的蛋白 表現。肺癌細胞 H146明顯下調 NF- κBp65蛋白的表現量。而丹參酮 ⅡA作用在肺癌細胞株(A549 ，H292 ，H146)後，可上調 DNA damage 185 中醫藥年報 第 27 期第 2冊 inducible transcript 3及下調 CYCLIN B2 ，AURORA KINASE A ， KINESIN FAMILY MEMBER 14 和 KINESIN FAMILY MEMBER 20A 的基因表現。 藉由動物實驗，證明丹參酮 ⅡA 經由口服和腹腔注射 的安全性很高。 藉由腹腔注射治療，可減少荷肺癌細胞(H146)小鼠死 亡，並且部份有療效。丹參酮 ⅡA 將來是很有潛力的肺癌輔助治療 藥物。 關鍵詞〆黄蓍皂苷Ⅳ ，丹參酮 ⅡA ，肺癌 ，生物晶片 186 中醫藥年報 第 27 期第 2冊 編號〆CCMP95-RD- 206 Effects of Astragaloside IV and Tanshinone ⅡA on Gene Expression in Human Lung Cancer Cells Chin-Cheng Su Buddhist Tzu Chi General Hospital