第十讲 赖氨酸的生产工艺.ppt

赖氨酸的生产工艺 Preparing technology of Lysine 1. 赖氨酸概述 (1) 赖氨酸是人和动物营养的必需氨基酸，它对于机体的生长有着重要的影响。 在八种必需氨基酸中，是唯一的仅L-型成分才能有效利用的基本氨基酸。 而在小麦、玉米、稻米等植物蛋白质中缺乏赖氨酸，因此赖氨酸广泛应用于营养食品、食品强化剂、饲料及医药等方面。 1.赖氨酸概述 (2) 赖氨酸广泛存在于动物蛋白质中，赖氨酸的生产最早是用酸水解酪素，经分离谷氨酸后制得，其后又从血粉中提取（猪血粉中赖氨酸含量约9%～10%），但这种方法，工艺比较复杂，产量受到限制。 1.赖氨酸概述 (3) 1960年以来，日本用营养缺陷型的谷氨酸菌株直接发酵生产赖氨酸，其产量不断扩大。 1977年，日本东丽公司以合成的己内酰胺为原料，用酶法生产L-赖氨酸。 1.赖氨酸概述 (4) 目前，国际上赖氨酸产生菌种的生产水平一般为12～14 g/L，对糖的转化率为45%。采用淀粉水解糖（或纯糖）发酵，其产酸率、提取率较高；而采用糖蜜发酵，其产酸率、提取率要低一些。 1.赖氨酸概述 (5) 采用淀粉水解糖(或纯糖)发酵，其产酸率为9%～11%，提取率为83%～87%，原料消耗3.2～3.5t(淀粉)/t(赖氨酸)； 而采用糖蜜(含糖50%)发酵，其产酸率7%～9%，提取率80%～85%，原料消耗6～8t/t。我国广西赖氨酸厂，采用甘蔗糖蜜发酵，菌种产酸率8.2%，提取率82.4%，接近国际先进水平。 2.赖氨酸的性质(1) 赖氨酸盐酸盐的化学式为C6H14O2N2·HCl，含氮量为15.34%，相对分子质量182.65。 由于游离的赖氨酸易吸收空气中的二氧化碳，故制取结晶比较困难。一般商品都是赖氨酸盐酸盐的形式。 2. 赖氨酸的性质 (2) 赖氨酸的化学名为2,6-二氨基己酸，具有不对称的α-碳原子，故有两种光学活性的异构体（L/D型）。 2. 赖氨酸的性质 (3) 赖氨酸盐酸盐熔点为263℃，单斜晶系，比旋光度+21°。 在水中的溶解度为0℃时53.6g/100mL，25℃时为89g/100mL，50℃时为111.5 g/100 mL，70℃时为142.8 g/100 mL。 在酒精中的溶解度为0.1g/100mL。 2. 赖氨酸的性质 (4) 赖氨酸含有α-氨基及ε-氨基，只有在ε-氨基为游离状态时，才能被动物机体所利用，故具有游离ε-氨基的赖氨酸被称为有效赖氨酸。故在提取浓缩中，要特别注意防止有效赖氨酸受热破坏而影响其使用价值。 3.赖氨酸生物合成途径 赖氨酸的生物合成途径与其他氨基酸不同，依微生物的种类而异。 细菌的赖氨酸生物合成途径需要经过二氨基庚二酸（DAP）合成赖氨酸； 3. 赖氨酸生物合成途径(续） 酵母、霉菌的赖氨酸生物合成途径，需要经过α-氨基己二酸合成赖氨酸。 同样是二氨基庚二酸合成赖氨酸途径，不同的细菌，赖氨酸的生物合成途径的调节机制有所不同。 4 赖氨酸的生产发酵 赖氨酸的发酵生产有直接（一步）发酵和两步发酵。 赖氨酸的直接发酵法可使用黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌、乳糖发酵短杆菌、诺卡杆菌等，碳源可为葡萄糖、醋酸、乙醇和石蜡。其转化率和产酸率也有所不同。 直接发酵法工艺流程 赖氨酸的两步发酵法 先使用大肠杆菌的赖氨酸缺陷型菌株，因缺少二氨基庚二酸脱羧酶，不能生成赖氨酸，于是积累大量的二氨基庚二酸（DAP）。 然后再选用含有二氨基庚二酸脱羧酶的产气杆菌或大肠杆菌，进行酶法脱羧而生成L-赖氨酸。 4.1 L-赖氨酸生产菌种及扩大培养 直接发酵法生产赖氨酸工艺生产菌种： 中科院北京微生物研究所选育的北京棒杆菌AS1.563和钝齿棒杆菌PI-3-2(AECr、Hse-)；AEC赖氨酸类似物S-2-氨基乙基-L-半胱氨酸;Hse天冬氨酰半醛脱氢酶 黑龙江轻工研究所选育的241134及179等。 L-赖氨酸生产菌种（续） 这些菌种产酸水平一般为7～8g/L,转化率25%～35%，对我国赖氨酸的生产起了较大的作用。但产酸率和转化率均较低，与国外先进水平相比还有较大差距。 种子扩大培养 赖氨酸发酵一般根据接种量及发酵罐规模采用二级或三级种子培养。 培养条件：培养温度30-32℃。通风比1:0.2m3/(m3 ? min)，搅拌转速200r/min。培养时间 8～11h。 根据发酵规模，必要时可采用三级培养。 4.2 赖氨酸发酵工艺及控制要点 （1）发酵工艺流程 赖氨酸发酵工艺及控制要点(2) （2）发酵培养基组成 不同菌株，发酵培养基的组成不完全相同，赖氨酸发酵培养基的组成见有关文献。 赖氨酸发酵工艺及控制要点(3) （3）发酵工艺条件及影响因素 温度、 pH值控制、种龄和接种量、