动物组织中盐酸克伦特罗瘦肉精的测定.PDFVIP

动物组织中盐酸克伦特罗（瘦肉精）的测定 • 适用范围 适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物的检测。 • 提取 将5g动物组织、15mL乙酸乙酯、3mL10%碳酸钠溶液置于50mL离心管中，10000rpm 均质2min。6000rpm下离心2min，将上清液转至另一离心管中。用15mL乙酸乙酯重复提 取一次，合并提取液。 向乙酸乙酯提取液中加入5mL 0.1mol/L的盐酸溶液，涡动1min，然后再6000rpm下 离心1min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5mol/L NaOH溶液调节 pH至5.2，待净化。 • 净化 ® 活化/平衡：依次向Welchrom P-SCX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、3 mL水和3 mL 30 mmol/L盐酸溶液，流出液弃去； 上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去； 淋洗：依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干； 洗脱：用2×2 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃下氮气吹干； • 检测 50% 甲醇溶解残渣，涡动振荡1 min,过0.22μm滤膜，装入进样小瓶，进样10μL分 1 析。 色谱条件： 色谱柱： Ultimate XB-C18 液相色谱柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm） 流动相： 0.01 M磷酸缓冲液：甲醇=65:35 流速： 0.7 mL/min 进样量： 20 μL 柱温： 30 °C 检测波长： 244 nm 运行时间：11 min • 结果 回收率和重现性实验 将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓 度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批 次（样品典型回收率色谱图见附图）。 添加水平（μg/kg） 0.5 1.0 5.0 分析物分析物 Recovery RSD Recovery RSD Recovery RSD (%) (%) (%) (%) (%) (%) 盐酸克伦特 93.80 5.82 89.7 5.9 96.1 3.6 罗 2 3 猪肌肉中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱 猪肝脏中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱 本方法中使用到得耗材： • 固相萃取小柱 Welchrom® P-SCX 60mg/3mL (P/N:WSP020306) • 色谱柱：Ultimate® XB-18,50*2.1mm，3μm（P/N:Ult3B18205） • 13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜（P/N: WEL-SFNY213022） 4