湖羊、杜泊羊×湖羊F1代骨骼肌差异表达基因和miRNA的筛选与验证.pdfVIP

湖羊、杜泊羊×湖羊F1代骨骼肌差异表达基因和miRNA的筛选与验证.pdf

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目求 目 录 摘要……………………………………………………………………………………………………,,J ABSTRACT…….….....…..………………..…………..………....….…....…………...….……….....……….……..…….…...V 英文缩写说明…………………………………………………………………………………………Ix 第一章文献综述……………………………………………………………………………………….1 1.1骨骼肌生氏发育研究进展………………………………………………………………………….1 1.1.1骨骼肌的形成及发育…………………………………………………………………………2 1。1.2影响骨骼肌发育的因素………………………………………………………………………2 1.I.3基因芯片在骨骼肌生长发育研究中的应用………………………………………………一3 1.2microRNA研究进展…………………………………………………………………………………3 1.2.1 miRNA的生物学特性及形成………………………………………………………………..3 1.2.2 miRNA与靶基因的作用机理………………………………………………………………一4 1.2.3 miRNA在骨骼肌发育过程中的作用及研究进展…………………………………………..5 1.2.4高通量测序在microRNA研究中的应用……………………………………………………6 第二章湖羊、杜泊×湖羊F1代肌肉组织差异表达miRNA筛选与分析……………………………9 2.1试验动物与样品采集………………………………………………………………………………..9 2.2主要仪器与试剂……………………………………………………………………………………一9 2.2.1主要仪器设备…………………………………………………………………………………9 2.2.2主要试剂………………………………………………………………………………………10 2.2.3相关试剂配制……………………………………………………………………………….11 2.3试验方法……………………………………………………………………………………………11 2.3.1肌肉样品总RNA的提取及质检…………………………………………………………..1l 2.3.2miRNA测序…………………………………………………………………………………………………………….13 2.3.3定量PCR验证及数据分析…………………………………………………………………19 2.4结果与分析…………………………………………………………………………………………22 2.4.1总RNA质检结果…………………………………………………………………………..22 2.4.2文库的混合方案及质控……………………………………………………………………,24 2.4.3测序结果…………………………………………………………………………………….26 2.4.4 2.5讨{念………………….………………………………………………………………………………………………………………34 2.5.1MicroRNA及其研究方法……………………………………………………………………34 万方数据 胡手、桎油×湖羊Fl代爿骼肌芷”表达基幽jflmiRNA的筛选‘j验jE 2.5.2湖羊、杜泊×湖羊F1代2倍差异表达miRNA及定量结果讨论………………………..34 第三章湖羊、杜泊x湖羊F1代肌肉组织总RNA芯片检测及分析……………………………….37 3.1试验动物与样品采集………………………………………………………………………………37 3.2丰要仪器与试剂……………………………………………………………………………………37 3.2.1主要仪器……………………………………………………………………………………,37 3.2.2主要试剂…………………………………………………………………………………….38 3.2.3相关试剂配制………………………………………………………………………………

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