GB/T 36812-2018马铃薯黄矮病毒分子生物学检测方法.pdf

ICS 65.020.01 B 16 OB 中华人民共和国国家标准 GB/T 36812—2018 马铃薯黄矮病毒分子生物学检测方法 Molecular detection method of Potato yellow dwarf virus 2018-09-17 发布 2019-04-01 实施 发布 GB/T 36812—2018 ■1Z■ —1— 刖 百 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)提出并归口。 本标准起草单位 ：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国福清出入境检验检疫 局、福建农林大学、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人:沈建国、蔡伟、高芳銮、张永江、陈细红、李敏、王宇、吴祖建、陈寿铃。 T GB/T 36812—2018 马铃薯黄矮病毒分子生物学检测方法 1范围 本标准规定了马铃薯黄矮病毒(.Potato yellow dwarf ■virus)的分子生物学检测方法。 本标准适用于可能携带马铃薯黄矮病毒的植物及植物产品检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样 SN/T 2964 植物病毒检测规范 SN/T 3457 植物病毒分子生物学检测规范 3马铃薯黄矮病毒基本信息 中文名：马铃薯黄矮病毒 学名:Potato yelloiv divarf virus »缩写:PYDVO 分类地位：弹状病毒科(Rhabdoviridae)、细胞核弹状病毒属(Nucleorhabdo-uirus)。 马铃薯黄矮病毒的其他信息参见附录A。 4方法原理 马铃薯黄矮病毒的分子生物学特性是制定本检测方法的主要依据。 5仪器、用具及试剂 5.1仪器 高速冷冻离心机、电子天平、PCR仪、荧光PCR仪、水平电泳系统 、一20 °C低温冰箱和一80 °C超低 温冰箱、凝胶成像分析系统、p 计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台等。 5.2用具 可调移液器(2.5 p.L, 10 p-L, 20 #L, 100卩L, 200 p-L, 1 000 卩L)和可调移液器枪头、离心管、研 钵等。 5.3试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T 6682中相关规定 。RT-PCR检测试 剂见附录B； 实时荧光RT-PCR检测试剂见附录Co 1 GB/T 36812—2018 6抽样和样品制备 6.1抽样 尽量抽取有病毒危害症状的植物材料，PYDV的危害症状描述参见附录A；抽样方法按照