王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞增殖及β-酪蛋白表达的-生物通.docVIP

PAGE 2444 中 国 农 业 科 学 41卷 8期 秦 君等：王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞增殖及β-酪蛋白表达的影响 PAGE 2445 中国农业科学 2008,41(8):2442-2447 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.08.032 收稿日期：2007-06-18；接受日期： 基金项目：黑龙江省教育厅博士专项科研基金（HLJBSDJI2004-15）和科教部“863”项目（2006AA10Z1A4） 作者简介：秦 君（1982-），女，黑龙江哈尔滨人，硕士研究生，研究方向为动物生物化学与分子生物学。E-mail： happybarbara@126.com。通讯作者高学军（1969-），男，黑龙江阿城人，教授，研究方向为泌乳生物学与乳腺生物功能调控。Tel：0451E-mail：gaoxj5390@ 王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞增殖及 β-酪蛋白表达的影响 秦 君，李庆章，高学军 （东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨 150030） 摘要：【目的】以王不留行为试验材料，寻找王不留行促进泌乳的有效成分，为中药催乳针剂的研发提供理论依据。【方法】对王不留行3类主要成分（皂甙类、黄酮甙类及香豆素类）进行提取，并用化学方法及薄层层析方法予以鉴定。将3种成分分别以不同浓度添加到细胞培养液，采用MTT法检测3类成分对体外培养的小鼠乳腺上皮细胞增殖的作用，运用荧光定量RT-PCR方法对细胞中β-酪蛋白的表达进行检测，用激光共聚焦显微技术对细胞周期蛋白cyclin D1和细胞信号通路中磷酸化stat5因子的表达进行检测，最后通过动物实验进一步验证其有效成分的作用。【结果】王不留行皂甙类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖有明显的抑制作用（P＜0.05），对小鼠乳腺上皮细胞β-酪蛋白的表达无明显作用；王不留行香豆素类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖和β-酪蛋白的表达均无明显作用；王不留行黄酮甙类成分具有促进泌乳的作用，可通过诱导周期蛋白cyclin D1的表达而促进小鼠乳腺上皮细胞的增殖，并通过激活Jak-stat5信号通路诱导β-酪蛋白基因的表达。【结论】黄酮甙类成分是王不留行促进泌乳的有效成分之一。 关键词：王不留行；皂甙；黄酮甙；香豆素；乳腺上皮细胞；功能 Effect of Main Components from Semen Vaccariae on Multiplication and Expression of Beta-Casein of Mouse Mammary Epithelial Cell in vitro QIN Jun, LI Qing-zhang, GAO Xue-jun (Key Laboratory of Dairy Science Ministry of Education, Northeast Agricultural University, Harbin 150030) Abstract:【Objective】The objective of this test is to find one or several effective components in promoting lactating of Semen vaccariae, so as to provide scientific basis for the research and exploitation of galactopoiesis with Chinese traditional medicine.【Method】The extracting methods of the three main components from Semen vaccariae, saponin, flavonoid glycoside and coumarin, and the identification by using chemical methods and chromatographic methods were studied. Add these components to cell cultural medium at different concentrations. Then their effects on multiplication of mouse mammary epith