6-羟基烟酸3-单加氧酶（NicC）催化反应机理研究-ChinaXiv.PDFVIP

6-羟基烟酸3-单加氧酶 （NicC）催化反应机 理研究 王菲 胡春辉 于浩 (青岛农业大学 生命科学学院 山东省应用真菌重点实验室 青岛 266109) 摘 要：恶臭假单胞菌 （Pseudomonasputida）KT2440 中的6-羟基烟酸 （6HNA）3-单加 氧酶 （NicC）是烟酸代谢过程中的关键酶。NicC 通过在吡啶环上加羟基对吡啶环进行了 活化，从而使得吡啶环可在双加氧酶催化下开环最终被完全降解。本研究通过去除NicC 的N 端稀有密码子增加了NicC 的表达量，进一步利用Ni-Sepharose 重力柱对NicC 进行 了纯化。通过实验发现，NicC 的最适反应温度为30℃-40℃，最适反应pH 为8.0。Cd2+ 1 v 离子对于NicC 的酶活有明显的抑制作用。当NADH 的浓度为0.25 mM 的时候，底物 6HNA