紫外-可见分光光度法——(最终版).ppt

结构上的差别是在光敏金属的阳极和阴极之间加入了倍增级，因此产生的电流强度被增大，检测灵敏度是光电管的200多倍。 * 由检测器产生的电讯号需经放大显示，或经一些数学运算处理再显示。 * * 是将一束单色光轮流通过参比溶液和试样溶液来进行光强度测定。 * 它是通过一个以每秒几十转到几百转的速度匀速旋转的扇形镜将经单色器的光一分为二，分别透过试样池和参比池，然后用另一个扇形镜将两束光交替地照射到检测器上。可以消除光强度不稳而带来的误差。测量中不需要移动吸收池。能够连续绘制出吸收光谱曲线。 * 将同一光源发出的光分成两束，分别经过两个单色器，从而可以同时得到两个不同波长的单色光。它们交替的照射同一溶液，然后由接收器接收。由此得到的讯号是两波长处吸光度之差。当两个波长保持1～2nm间隔并同时扫描时，得到的讯号将是一阶导数光谱。双波长分光光度计灵敏度高、噪音低、测定准确度高。既能测定高浓度和多组分混合试样，也能测定一般分光光度计不宜测定的混浊试样。 * 由于紫外－可见分光光度计的型号很多，性能也有差异，不同型号的分光光度计，在以下的几个方面也有不同的性能参数。在书上也列出了三种不同型号分光光度计的性能参数指标。 * 含量测定一共有三种方法，我们先来看第一种方法——对照品比较法。 * 对于测定新品种的吸收系数，我们还有以下几点要求，它们分别是（1）…… * （1）如果含有水分，需要计算干燥失重并将水分扣除。（4）对于称量准确度的要求呢在中国药典的《凡例》部分有详细的规定 * * 它们的共同特点都是：样品不经分离…… * 每次放入方向相同——通常在比色皿的两光面的其中的一面都印有商标或者其它标记，所以每次放入样品室的方向要记住，保证是同一方向，以消除误差。 * * * 配制 * * 在使用紫外－可见分光光度计时，如果遇到了一些仪器故障，这里介绍了一些排除故障的方法。 * 结合公司的生产情况，我们有一个品种的滴眼液叫做玻璃酸钠滴眼液。它的含量测定方法是通过紫外－可见分光光度法来测定的。下面我们就具体的介绍一下它的测定方法。 * * 100ml的溶液中含有1g溶质、两者之间的转换关系用公式来表达就是这样, 其中M是吸光物质的摩尔质量。物质的吸光系数与测定波长有关 * 100ml的溶液中含有1g溶质。。。其中M是吸光物质的摩尔质量。。。物质的吸光系数与测定波长有关 * （3)也就是说物质在特定的波长下，它的摩尔吸光系数是具有唯一性的。 * * 吸光度有一个重要的性质是具有加合性。 * 吸收光谱的特征：吸收光谱的形状、吸收峰的数目、吸收峰的位置、吸收峰的强度和相应的吸光系数。光吸收定律就是朗伯比尔定律。 * 对比法我们可以把它分为三种，第一种是……第二种是……3：使用相同浓度的溶液和相同厚度的吸收池，吸光度的比值就是吸光系数的比值。 * 峰位不重叠：在某波长下，主成分无吸收，而杂质有吸收，在此波长下直接考察杂质的含量。峰位重叠：在某波长下，主成分为强吸收，杂质无吸收或者为弱吸收，则与纯品比较，待测物的最大吸收值就下降;如果杂质的吸收远远大于主成分的吸收，那么与纯品比较，待测物的最大吸收值就增加，光谱也会随之变形。2、①当大于此吸光度值时，我们认为该杂质超过了其限量，小于该吸光度值时，可以认为杂质含量低于其限量。 * * 如果已知光程长度L和吸光系数E，测得样品溶液的吸光度A，就可以得到被测物的浓度。 * * 当固定仪器和测定条件时，吸光度A与浓度c成正比关系。配制系列浓度的标准溶液，在该条件下分别测定吸光度，绘制吸光度－浓度标准曲线，得到回归方程，在相同条件下测定样品溶液的吸光度，可从标准曲线上得到样品溶液的浓度。 * 在该条件下分别测定吸光度，绘制吸光度－浓度标准曲线，得到回归方程，在相同条件下测定样品溶液的吸光度，可从标准曲线上得到样品溶液的浓度。 * 配制浓度接近的标准溶液和样品溶液，当固定仪器和测定条件时，在选定的波长处分别测定吸光度。 * 吸光度A与浓度c成正比关系，根据比值公式，可以得到待测样品的浓度。 * * 对于吸收光谱有部分重叠的混合组分，可根据吸光度的加合性原则，通过适当的数学处理来进行定量。在组分a和b的最大吸收波长λ1和λ2处，分别测定混合物的吸光度，然后通过解二元一次方程组得到a、b两组分的浓度。 * 对于混合物，若b为待测组分，为了消除组分a的干扰吸收，用作图法选择波长。选择波长的原则是：……同样是根据吸光度的加合性质原则，分别在两个波长处测定混合物的吸光度，再通过数学运算，消除干扰组分，得到待测组分的浓度。 * 当干扰组分不成峰形、无等吸收点，采用此法。设定干扰组分y在波长λ1处的吸光度是λ2处吸光度的K倍，由此引入倍率系数K，最终通过适当的数学运算干扰组分被消除。 * 对吸收光谱曲线进行一阶或高阶求导，即可得到各种