光损伤大鼠视网膜TNF―α表达变化和米诺环素对其表达影响实验探究.docxVIP

光损伤大鼠视网膜TNF-a表达变化和米诺环素对其表达影响实验探究 【摘要】目的：观察光损伤大鼠视网膜肿瘤坏死因 子(TNF) -a表达变化的规律，及预先使用米诺环素 (Minocycline, MC)对其分泌表达的影响，探讨视网膜光 损伤的损伤机制和防治措施。方法：54只SD大鼠，随机分 为光照对照组、光照实验组、正常对照组，前两组再各分为 光照后6h、3d、7d、14d组，每组各6只大鼠(12只眼)。 光照前90min,光照实验组大鼠MC灌胃(45mg/kg),光照对 照组大鼠等量PBS 照组大鼠等量PBS液灌 O分别于预定时间点取眼球，左眼 石蜡包埋、HE染色、TNF-a免疫组化染色，计算机图像分 析软件(Image-Pro Plus, IPP)测量视网膜外核层(outer nuclear layer, 0NL)厚度。右眼球摘除后即刻完整取出视 网膜，匀浆后取上清液，ELISA法测定TNF-a的吸光度(0. D) 值并计算出TNF-a浓度。SPSS行统计分析。结果：1,正常 对照大鼠视网膜形态正常，TNF-a未见阳性染色，ELISA定 量仅含微量。2,光照对照组视网膜6h即出现病理改变，3d 和7d进行性加重，14d略有减轻。视网膜TNF-a阳性表达 6h开始增加，3d显著增加，7d减少,14d进一步减少,ELISA 定量结果和免疫组化结果相平行。各时间点ONL厚度、TNF