03第三章-酶的提取与分离纯化.pptVIP

酶的提取与分离纯化是指将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来，再与杂质分开，而获得所要求的酶制品的过程。 主要包括细胞破碎、提取、离心分离、过滤与膜分离、沉淀分离、层析分析、电泳分离、萃取分离、浓缩、干燥、结晶等 1、纸上层析 以滤纸为支持物的分配层析。组成滤纸的纤维素是亲水物质，能形成水相和展层溶剂的两相系统，被分离物质在两相中的分配保持平衡关系。纸层析用于分析简单的混合物时可做单向层析。 2、薄层层析 是将吸附剂、载体或其他活性物质（如纤维素、硅胶、离子交换剂、氧化铝或聚酰胺等）均匀涂铺在平面板（如玻璃板、塑料片、金属片等）上，形成薄层（常用厚度为0.25毫米左右）后，在此薄层上进行层析分离的分析方法。 薄层层析较纸层析优越在于分辨高，展层时间短。 是利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。 三、离子交换层析 离子交换剂是含有若干活性基团的不溶性高分子物质。通过在不溶性高分子物质（母体）上引入若干可解离基团（活性基团）而制成。 作为不溶性母体的不溶性物质通常有苯乙烯树脂、酚醛树脂、纤维素、葡聚糖、琼脂糖等。 按活性基团的性质不同，离子交换剂可以分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。 酶分子具有两性性质，所以可用阳离子交换剂