酶工程课件——CH5-2-固定化酶的性质.pptVIP

CH5-2 固定化酶的性质1. 固定化处理对酶性质的影响 从溶液酶的游离状态，到固定化酶的“局限”状态，是一个很大的转变。不仅酶分子本身，而且酶反应的环境也有所不同。因而，固定化酶的性质与溶液酶大相径庭 固定化酶的制备方法很多，酶在固定化过程中，对酶反应系统产生的影响各不相同。我们假定酶固定化之后，在载体表面或多孔介质内的分布完全均匀，我们不考虑固定化处理过程中，技术操作的问题，我们可以将固定化带来影响概括为如下三个方面： CH5-2 固定化酶的性质2. 固定化的酶性质 ⑴ 分配效应对Km的影响 这种影响通常用分配系数(ρ)来描述： ρ＝[Si]／[S] (1) 式中[Si]和[S]分别表示底物或其它效应物在微环境中的局部浓度和宏观体系中的总体(或平均)浓度。 CH5-2 固定化酶的性质2. 固定化的酶性质 ⑵ 扩散限制效应 酶固定化之后，由于扩散限制，使得酶往往不能得到宏观体系相同水平的底物，因而观测到的实效反应速度，常低于理论预测的水平。对于这种影响，通常引用实效系数ηO进行定量讨论。 v=ηOvp ηO = v /vp （1） ? 式中v为实效反应速度，vp为理论预期反应速度，即由溶液酶的米—孟氏方程确定的速度。 Vmax[S]