放射配基分析法对人食管下括约肌M受体与配基亲和力的分析.pdfVIP

放射配基分析法对人食管下括约肌M受体与配基亲和力的分析.pdf

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中文摘要 学第四医院因高位食管中段癌行食管大部切除术患者8例, 采集未受侵的套索纤维和钩状纤维, 制成约 弃上清后,以美国PIERCE公司的膜蛋白提取试剂盒将沉淀 运用膜蛋白萃取法制备受体膜蛋白,反应缓冲液稀释,考马斯 lal,使得 记配基,Atropine为拮抗剂,反应体系总体积250 拮抗剂,以上述反应体系重复前面的过程进行竞争抑制试 验。5)以49型玻璃纤维滤膜采用负压抽滤的办法分离结合 和游离配基,将含有结合配基的受体的滤膜置于液体闪烁计 Prism4.03软件绘制浓 数仪中计数。实验结果采用Graphpad 度效应曲线及竞争抑制曲线,并计算平衡解离常数Kd,最 13.0软件分析 大结合量Bm。x和半效抑制浓度IC50;用SPSS 实验结果,以P≤O.05有显著性差异。 结果: 1.饱和结合试验:分别得出M受体在套索纤维和钩状纤维 的饱和曲线,并得出在LES的套索纤维上3H。QNB与M Kdc为 最大结合量Bm觚c为557.9士10.41cpm, 中文摘要 钩状纤维和套索纤维上无统计学差意义(t=0.782, p=O.391),平衡解离常数在钩状纤维和套索纤维上无统计 学差意义(t=O.395,p=0.540)。 2.竞争抑制实验:得出M2受体和M3受体拮抗剂分别在套 索纤维和钩状纤维的竞争抑制曲线,同时在LES的套索 12x 为5.422+0.1 和M2、M3受体结合的抑制作用有统计学差异(t=6.26, x1 制浓度IC50M毗¨d—me为1.993+0.0650~mol/L,4.DAMP 和套索纤维上的抑制作用无统计学差异(t=0.079, 异(户O.024,P=O.878)。 结论: 合,M受体与3H.QNB的亲和力套索纤维和钩状纤维上 的分布无差别。 纤维膜上的M3受体的特异性结合的抑制作用强于M2受 纤维膜上的M2受体的特异性结合的抑制作用。该结果 中文摘要 说明M3受体较M2受体与配基的亲和力更强。 3. 作用在套索纤维和钩状纤维间无差别。 关键词:胆碱能受体;M2受体;M3受体;放射配基结 合分析法;食管下括约肌。 英文摘要 ——————————————————————————————————————————一一 l一一一一l of of Investigation muscarinic affinity toits receptors inhuman ligands lower esophagealsphincter Abstract Objective:Lower the esophageal lncrassate musclebundle locatedatthe

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