皂苷与斑玉蕈抗氧化酶活性相关性与其转录水平上的初步分析.pdfVIP

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2019-06-24 发布于安徽
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皂苷与斑玉蕈抗氧化酶活性相关性与其转录水平上的初步分析.pdf

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皂苷与斑玉蕈抗氧化酶活性相关性及其转录水平的初步分析 3．7皂苷含量与抗氧化酶的相关性分析…………………………………………………一21 4分析与讨论……………………………………………………………………………………．22 第三章外源皂苷对斑玉蕈菌丝体皂苷合成及抗氧化酶活性的影响………………………………25 第一节外源皂苷对菌丝体皂苷含量及抗氧化酶活性的影响……………………………………25 1材料与方法……………………………………………………………………………………．25 1．1 供试菌株………………………………………………………………………………一25 1．2化学试剂………………………………………………………………………………一25 1．3主要仪器………………………………………………………………………………．．25 2实验方法………………………………………………………………………………………．25 2．1菌丝体培养及处理方法………………………………………………………………一25 2．2外源皂苷对斑玉蕈菌丝生长速度的影响……………………………………………．．26 2．3外源皂苷对内源皂苷含量的影响……………………………………………………．．26 2．4外源皂苷对抗氧化系统相关酶活性的影响…………………………………………一26 3实验结果………………………………………………………………………………………．26 3．1 外源皂苷对斑玉蕈菌丝生长速度的影响……………………………………………．．26 3．2外源皂苷对斑玉蕈菌丝体内源皂苷含量的影响……………………………………．．27 3．3外源皂苷对斑玉蕈菌丝体SOD酶活性的影响………………………………………28 3．4外源皂苷对斑玉蕈菌丝体CAT酶活性的影响………………………………………．29 3．5外源皂苷对斑玉革菌丝体超氧阴离子含量的影响…．………………………………．30 3．6外源皂苷对斑玉蕈菌丝体MDA含量的影响…………………………………………31 4分析与讨论……………………………………………………………………………………．32 第二节外源皂苷对菌丝体鲨烯合酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶基因表达量的影响……34 1材料与方法……………………………………………………………………………………．34 1．1供试菌株………………………………………………………………………………．．34 1．2化学试剂………………………………………………………………………………．．34 1．3实验仪器………………………………………………………………………………．．35 2实验方法………………………………………………………………………………………．35 2．1菌丝体的培养及处理方法……………………………………………………………一35 2．2斑玉蕈菌丝体总RNA的提取及反转录………………………………………………35 2．3 目的基因编码区的获得………………………………………………………………．．37 2．4常规PCR扩增目的片段………………………………………………………………37 2．5标准质粒的构建………………………………………………………………………．．38 2．6基因表达量的测定……………………………………………………………………．．41 3结果与分析……………………………………………………………………………………．4l 3．1 RNA质量的检测………………………………………………………………………41 3．2 目的基因条带扩增……………………………………………………………………．．42 万方数据目录 3．3克隆测序结果…………………………………………………………………………．．42 3．4斑玉蕈菌