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- 2019-06-24 发布于江西
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苏教版高中生物选修1生物技术实践分子生物学技术.ppt
分子生物学技术
1.根据DNA复制的原理及过程,理解PCR技术的原理及过程。(重点)
2.掌握PCR技术的基本操作。
使用PCR仪的安全措施
盖子
样品池及池盖内
高温、高压
运行
毛细管
电源
电源
清洁
PCR实验室里
防护服
防护手套
所有的电源
聚合酶链式反应程序
DNA
脱氧核苷酸
脱氧核苷酸
Taq聚合
94 ℃
解旋成为单链DNA
40~60 ℃
引物
72 ℃
4种脱氧核苷酸
目的DNA片段的体外扩增
5 μL10×PCR
dACP、dCTP、dGTP、dTTP
1 μL
5 μL
5 μL
29 μL
5 min
2 min
Taq聚合酶
94 ℃
94 ℃
30 s
56 ℃
30 s
72 ℃
30 s
72 ℃
5 min
二苯胺试剂
蓝色的深浅
PCR技术的反应原理与反应过程
①如何理解PCR技术的反应原理?
②怎样理解PCR的反应过程?
3.PCR扩增的计算
理论上DNA呈指数方式扩增。若开始只有一个DNA提供模板,则循环n次后有2n个;若开始有N0个DNA提供模板,则循环n次后获得的子代DNA数目为N0·2n个。
实验操作的注意事项
①实验操作应注意哪些问题?
②PCR扩增成功的关键是
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