GE中低压层析柱 柱效测定方法 详解.docVIP

GE中低压层析柱 柱效测定方法 柱效测定是一项经常使用的操作，对于定量表征层析柱的工作状态是否良好，工艺的验证具有重要的意义。但是实际工作中很多朋友都遇到不会测柱效或者测出来注销过低的状况，不知道如何解决。所以今天我就给大家详细介绍一下柱效的正确测定方法，以及经常遇到的问题如何解决。本方法适用于所有GE公司中低压液相色谱的预装柱及自己填装的层析柱。介绍分为5个部分，测前准备、试剂选择、测柱效操作、测试结果积分、经常发生的问题。1. 测前准备：⑴?KTA层析设备。要求设备的型号与层析柱大小匹配，从上样阀门到紫外和电导检测器之间的体积要做到最小 （管路内径尽量细，管路尽量短），这对于准确测量实验室小层析柱的柱效非常重要。⑵测试平衡溶液及样品。这个部分在试剂选择中单独细说。⑶装填好的层析柱。使用平衡缓冲液在测柱效的流速下至少平衡1.5 CV（柱体积），平衡方向与测柱效方向必须 一致⑷样品环。容积大于1%柱体积。2. 试剂选择测柱效主要有两种测试系统：1 NaCl 测试系统；2 丙酮测试系统。只要操作正确，两个系统测出来的结果是 基本一致的。但是要注意：各试剂的浓度不能随意改变，否则影响测试结果。⑴NaCl测试系统对于所有种类的柱子和填料，都可以使用氯化钠系统测柱效平衡液： 0.4 M NaCl水溶液样 品： 0.8 M NaCl水溶液3. 测柱效操作