基因型的鉴定心得.pptxVIP

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培训心得之基因型鉴定;基因型鉴定基本步骤;DNA提取;;;;动物基因型检测记录表;;DNA提取的总流程;裂解液的配方 蛋白酶K(PK):储存浓度:10mg/ml;终浓度100ug/m; -20℃保存。 储存液可以事先配制好,蛋白酶K要现用现配。 配制列子:10ml裂解液 Tris-HCl 1ml EDTA 100ul NaCl 667ul SDS 200ul 蛋白酶K 100ul 10000ul(10ml)-1967ul=8033ul水 ;提取具体步骤;PCR鉴定;引物设计;条件摸索;常见问题;;;PCR中对照组的设立;Cre 一种重组酶,可由噬菌体转染到细胞,催化Loxp位点间的DNA进行特异性重组。 Loxp 34bp序列,两端是13bp的反向重复序列,中间是其定向作用的8bp间隔区。 重组产物 根据loxp位点的位置和相对方向而不同,在一条链上单loxp位点的DNA将被融合。 ;Flp-Frt system:主要用来去除Neo;;;;PCR过程中各种对照组的选择;;;获得条件性基??敲除/敲进小鼠;;;;获得fl纯合子小鼠;

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