污染填料后教材对色谱柱的处理过程.pdfVIP

色谱柱再生 ――污染填料后对色谱柱的处理过程 （大连依利特仪器分析有限公司） 1 故障现象 用户反映YWG C18 10 μ（4.6mmX150mm ）色谱柱使用20 天左右后，柱压升 高约1Mpa 左右，分离效果变差，用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。 色谱柱分离度不好，柱效不高，可能是用户分析发酵液，简单的过滤后进样 分析，其中的蛋白质等可能没有去除完全，致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中， 加之对沉淀的蛋白质没有及时冲洗，长时间后，破坏 C18 官能团，而且客户使 用纯水长时间冲洗色谱柱，官能团坍塌的可能性也很大。色谱柱压力增加，可能 是柱头筛板被样品杂质堵塞，或者填料被污染或被流动相破坏，导致柱床层堵塞。 2 检测 用 10%乙腈水，1.0mL/min 的流量冲洗色谱柱，冲洗大约30 分钟，将色谱 柱中可能存在的磷酸缓冲盐置换掉。然后用85% 甲醇流动相，尿嘧啶、硝基苯、 萘、芴反相样品评价色谱柱，结果如下： -96.85 -97.05 -97.25 ] v