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第一章 绪论
1、细胞学说 1847年由德国科学家施莱登和施旺提出。细胞学说的主要内容有:
① 细胞是有机体, 一切动植物都是由单细胞发育而来, 即生物是由细胞和细胞的产物所组成;
② 所有细胞在结构和组成上基本相似;
③ 新细胞是由已存在的细胞分裂而来;
④ 生物的疾病是因为其细胞机能失常。
2、分子生物学的概念:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间的相互作用的关系及其基因表达调控机理的学科。
3、中心法则 1958年由克里克提出
4、分子生物学的研究内容:
a:DNA重组技术(基因工程)
b:基因的表达调控
c:生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学)
d:基因组、功能基因组与生物信息学研究
【名词解释】:
1、同功tRNA:多个tRNA携带一种氨基酸,这些tRNA称为同功tRNA。
2、iRNA:即起始RNA,DNA合成的引物
3、核酶:即具有催化作用的一类RNA分子。
4、端粒酶:是一种自身携带模板RNA的逆转录酶,催化端粒DNA的合成,能够在缺少DNA模板的情况下延伸端粒内3’端的寡聚核苷酸片段,包含两个活性位点,即逆转录酶活性和核酸内切酶活性。
5、反义核酸:是根据碱基互补原理,用人工合成或生物体自身合成的特定互补的DNA或RNA片段(或其化学修饰的衍生物),能够与目的序列结合,通过空间位阻效应或诱导RNase活性,在复制、转录、剪接、mRNA转运及翻译等水平,抑制或封闭目的基因的表达。
核酸的结构与功能
1、染色质的类型分为两种类型: 常染色质和异染色质。
常染色质处于伸展状态,碱性染料着色浅而均匀;
异染色质处于凝集状态,碱性染料着色较深。
2、染色质蛋白质分为两类:组蛋白和非组蛋白。核心组蛋白,包括H2A、H2B、H3、H4和H1
3、组蛋白的特性:
(1)、进化上极端保守;
(2)、有组织特异性;
(3)、肽链上的氨基酸分布不对称;
(4)、组蛋白有被修饰的现象;
(5)、富含Lys的组蛋白H5
4、核小体:用于包装染色质的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的。
先由四种组蛋白H2A、H2B、H3、H4 构成八聚体
5、染色质的高级结构:
1) 染色质的一级结构——核小体
2)染色质的二级结构——螺线体
3)染色质的三级结构——超螺线体
4)染色质的四级结构——染色单体
6、主要的RNA种类有rRNA(核糖体RNA)、mRNA(信使RNA)、tRNA(转移RNA)、HnRNA(核不均一RNA)、SnRNA(核内小RNA)、SnoRNA(核仁小分子RNA)、ScRNA(细胞质RNA)等。
7、RNA的功能:
①作为细胞内蛋白质合成中核蛋白复合物的结构组分,参与蛋白质的生物合成;
②具有生物催化剂功能,作用于初始产物的剪接加工;
③参与基因表达的调控;
④与生物体的进化有关。
8、原核生物mRNA的结构特点:
①具有多顺反子结构;
②5′端无帽子结构,3 ′端一般无多聚A(Poly A)的尾巴;
③一般没有修饰碱基。
9、每种顺反子是一个特异的翻译区。
10、真核生物mRNA结构的特点:
①5 ′末端有帽子结构。
②3′端多数带有多聚A(Poly A)的尾巴
③分子中可能有修饰碱基,主要是甲基化
④分子中有编码区与非编码区。
11、tRNA的结构与功能
1) tRNA是分子最小,但含有稀有碱基最多的RNA,其稀有碱基的含量可多达20%。多为甲基化。
2) tRNA是保守性最强的RNA。
3) tRNA是单链核酸,含73~93个核苷酸,但其分子中的某些局部也可形成双螺旋结构。
4) 5 ′端总是磷酸化,且常是pG。
5) 3 ′端为CCA-OH。
6) 二级结构为三叶草形, 三级结构为倒L型。
12、rRNA的结构与功能
①rRNA是细胞中含量最多的RNA,占总量的80%。rRNA与蛋白质一起构成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。
②在原核生物中,rRNA有三种:5S,16S,23S。其中,16S的rRNA参与构成核蛋白体的小亚基,而5S和23S的rRNA参与构成核蛋白体大亚基。
③在真核生物中,rRNA有四种:5S,5.8S,18S,28S。其中,18S的rRNA参与构成核蛋白体小亚基,其余的rRNA参与构成核蛋白体大亚基。
13、反义RNA的定义:碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA,又称为调节RNA。
作用机制:可与mRNA配对结合形成双链,最终抑制mRNA作为模板进行翻译。
【核酸的变性、复性和分子杂交】
14、DNA的变性:在理化因素作用下,DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链,从而导致D
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