3.微粒子化学发光免疫分析 (microparticle chemiluminescence immunoassay,MLIA) 以顺磁性微粒作为载体包被抗体,利用磁性微粒能被磁场吸引,在磁力的作用下发生力学移动的特性,迅速捕捉到被测抗原。 加入碱性磷酸酶标记的第二抗体,形成磁性微粒包被抗体-抗原-酶标记抗体复合物 经洗涤去掉未结合的抗体后,加入ALP的发光底物AMPDD,AMPDD被复合物上ALP催化发光,发射光所释放的光子能量被光量子阅读系统记录,通过计算机处理系统将光能量强度在标准曲线上转换为待测抗原的浓度。 原理: AMPDD一侧的芳香基团上的磷酸酯被水解,失去一个磷酸基而生成一个中等稳定的中间体AMPPD(半衰期2~30min),此中间体通过内部电子转移而裂解为一分子的金刚烷酮和一分子激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当回到基态时发出波长为470 nm的光) 常用标记物: A L P 反应特点: ①可采用竞争法和夹心法,多采用双抗体夹心法 ②采用磁性微粒作为固相载体,以碱性磷酸酶作为标记物,固相载体的应用扩大了测定的范围,检测水平可茯Pg·mL-1,重复性好。 五、相关仪器介绍 ADVIA CENTAUR全自动免疫分析仪 (一)ADVIA CENTAUR检测原理 利用化学发光和磁性微粒子分离技术相结合的测定方法,用高敏感性的吖啶
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