高等植物基因工程.pptVIP

第二节 植物基因工程方法 一 、植物遗传转化的方法　　植物遗传转化技术可分为两大类： （一）生物介导的转化方法 主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 （二）直接基因转移技术 包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转 化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。 1、农杆菌的Ti质粒与T-DNA的整合机制 几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染，而产生根瘤。它是一种革兰氏阴性土壤杆菌（A. tumefaciens）。其致瘤特性是由Ti（tumor－inducing）质粒介导的。 Ti质粒（Tumor induced plasmid） T-DNA T-DNA长约23kb（ 15kb-30kb ） ，共有三套基因： Auxin Cytokinin Opine 合成的植物生长素与细胞分裂素，促使植物创伤组织无限制地生长与分裂，形成冠瘿瘤。 Ti质粒（Tumor induced plasmid） 环状ds-DNA,160-250kb，具六个功能区 致瘤区：合成植物生长素和细胞分裂素 冠瘿碱合成区：参与冠瘿碱合成 冠瘿碱分解区：参与冠瘿碱分解 Ti 质粒转移区(tra)：参与在不同农