蛋白纯化层析技术与工艺放大.pptVIP

过滤操作方式选择 过滤常见的操作方式包括NFF死端过滤和CFF切向流过滤 切向流过滤技术的选择 中空纤维柱和平板膜包的优缺点： 切向流过滤技术的选择 中空纤维滤膜具有开放式流道(Open Channel ) ，剪切力低且容尘量高，适合病毒和蛋白等生物大分子低剪切力的温和超滤浓缩、可直接处理高固含量高黏度的复杂料液，如细胞菌体收集、裂解液澄清和硫酸铵沉淀收集等应用。 平板膜包的筛网流道结构( Screen Channel ) ，适合无固体颗粒的低黏度低浓度样品的浓缩，如层析柱之间的缓冲液交换和浓缩等。 切向流过滤技术的选择 中空纤维滤膜可以用于微滤或超滤，用于蛋白/ 病毒等浓缩洗滤或直接处理高固含量料液； 而平板膜包常用于澄清料液的超滤浓缩，对于高固含量高黏度样品的澄清过滤存在较大局限性，易于堵塞流道。 四、 Process Scale up 工艺放大 菌种的特性，相关论文、专利，药典，试剂等 亲和层析、离子层析、疏水层析、分子筛、超滤，层析介质粒径大小，纯化步骤等 载体构建优化、发酵工艺优化、纯化工艺优化、检测方法选择等 发酵工艺是否能够放大、纯化工艺是否能放大等，工艺稳定性 环境安全性：废气废液排放，菌种的处理，选择有关试剂的替代品 知识产权的保护，专利什么时候到期？ Regulatory requirements 了解相关法律、法规、验证计划、QA和QC等