Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Vero细胞）.PDFVIP

1 Sabin 株脊髓灰质炎灭活疫苗（Vero 细胞） 2 Sabinzhu Jisuihuizhiyan Miehuoyimiao (Vero Xibao) 3 Poliomyelitis Vaccine (Vero cell), Inactivated, Sabin Strains 4 本品系用脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型减毒株分别接种于Vero 细胞，经病 5 毒培养、收获、浓缩、纯化、灭活、按比例混合后制成。用于预防脊髓灰质炎。 6 1 基本要求 7 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合 “凡例”的有 8 关要求。 9 2 制造 10 2.1 生产用细胞 11 生产用细胞为Vero 细胞。 12 2.1.1 细胞管理及检定 13 应符合 “生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 14 每批原液的生产应来自复苏扩增后的同一细胞批。 15 各级细胞库代次应不超过批准的限定代次。 16 2.1.2 细胞制备 17 取工作细胞库中的细胞，经复苏、消化、置适宜温度下培养后，逐级放大， 18 制备的一定数量并用于接种病毒的细胞为一个细胞批。培养过程中对温度、溶氧 19 浓度、pH 值及搅拌速度等培养条件进行监控。 20 2.2 毒种 21 2.2.1 名称及来源 22 生产用毒种为脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 Sabin 株或Ⅲ型 Sabin 纯化株 23 （Pfizer 株）。毒株应来源于世界卫生组织（WHO ）或其认定机构。 24 2.2.2 种子批的建立 25 应符合 “生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。 26 2.2.2.1 原始种子批 27 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒Sabin 株及Pfizer 株的原始毒种均由毒种研制者制备和保 28 存。 29 2.2.2.2 主种子批和亚主种子批 30 主种子批Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒 Sabin 株的传代水平为 SO+1，Ⅲ型病毒 Pfizer 31 株的传代水平为RSO1 ，均来源于WHO 主种子库。可取主种子批毒种在Vero 细 32 胞上传一代制备的成分均一的一批病毒悬液称为亚主种子批。亚主种子批Ⅰ、Ⅱ、 33 Ⅲ型病毒Sabin 株的传代水平为SO+2，Ⅲ型病毒Pfizer 株的传代水平为RSO2 。 34 2.2.2.3 工作种子批 35 取主种子或亚主种子批毒种在Vero 细胞上传一代制备的成分均一的一批病 36 毒悬液称为工作种子批。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒 Sabin 株工作种子批的传代水平为 37 SO+3，Ⅲ型病毒Pfizer 株传代水平不超过RSO3 。 38 2.2.3 种子批毒种的检定 39 除另有规定外，工作种子批应进行以下全面检定。 40 2.2.3.1 鉴别试验 41 取适量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型单价脊髓灰质炎病毒特异性免疫血清与适量病毒供试品 42 混合，置35℃～37.5℃中和2～3 小时，接种Hep-2 细胞或其他敏感细胞，置36℃ 43 ±1 ℃培养，7 天判定结果，病毒型别应准确无误。同时设血清和细胞对照，均应 44 为阴性。病毒对照应为阳性。 45 2.2.3.2 病毒滴定 46 采用微量细胞病变法。取毒种做 10 倍系列稀释，取适宜的至少3 个稀释度 47 病毒液接种Hep-2 细胞或其他敏感细胞，置36℃±1 ℃培养，7 天判定结果。病毒 48 滴度均应不低于6.5 lg CCID50/ml 。应同时进行病毒参考品滴定。 49 2.2.3.3 无菌检查 50 依法检查（通则1101），应符合规定。 51 2.2.3.4 分枝杆菌检查 52 照无菌检查法（通则1101)进行。 53 以草分枝杆菌 （CMCC95024 ）作为阳性对照菌。取阳性对照菌接种于罗氏 54 固体培养基，于37℃ 培养3～5 天收集培养物，以0.85～0.9% 氯化钠溶液制成 55 菌悬液，采用细菌浊