痰抗酸杆菌的荧光染色法.pptVIP

抗酸杆菌的荧光染色检查法 抗酸杆菌的荧光染色检查法 主要内容 1.原理 2.操作程序 3.舜宇EX30荧光显微镜的操作使用 4.质量控制 抗酸杆菌荧光染色的原理 抗酸杆菌是无色半透明的有阴电荷和很微弱的固有荧光的微生物，而荧光素金胺O是一种含有自由氨基的金黄色碱性染料，它的离子带有阳电荷，因此金胺O能和带阴电荷的抗酸杆菌结合而使其着荧光色素，当其遇到紫外线或青色线时，即可激发出桔黄色荧光。 抗酸杆菌荧光染色检查操作程序 （一）涂片 ①取经95%乙醇擦拭脱脂过的干燥、清洁、无油污、无划痕的新玻片，于玻片磨砂端用铅笔在背面左端1/3标注实验编号和序号； ②在生物安全柜内，小心打开标本容器，用折断的竹签（需事先准备好）茬端挑取痰标本的脓样、干酪样部分，于玻片右侧2/3处均匀涂抹成10×20mm卵圆形痰膜，待自然干燥。 抗酸杆菌荧光染色检查操作程序 （二）染色 1．把痰片放在染色架上，痰片间距应大于10mm，火焰固定(5秒钟火焰在玻片下方通过4次)；2.滴加0.1%金胺Ｏ染液，盖满痰膜，保持染色 15分钟。染色时应始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可续加染色液。 抗酸杆菌荧光染色检查操作程序 （二）染色 3．流水自玻片上端轻缓冲洗，洗去染色液后倾斜玻片沥去残余水； 4．滴加脱色液（3%盐酸乙醇），脱色3分钟或至痰膜无色； 5.流水自玻片上端轻洗，如果脱色不彻底，重复