不同发育阶段大鼠脑髓鞘化的研究-第三军医大学学报.doc

不同发育阶段大鼠脑髓鞘化的研究 张雨平 黄其林 赵聪敏 （第三军医大学新桥医院 重庆 400037） 摘　要: 目的　研究大鼠不同发育阶段脑髓鞘化的发展及规律。方法　应用LFB髓鞘染色、MBP免疫组化及Western-blot观察不同发育阶段大鼠脑髓鞘的分布及变化。结果　LFB及MBP免疫组化染色E18、P0、P2均未见着色，P7大鼠胼胝体中部少量LFB着色，P15两种染色均呈阳性，P30着色加深，与P90，P720类似。通过western-blot检测MBP蛋白在孕中后期已有表达，出生后随日龄增长逐渐增加，至老年期表达量最高。结论　大鼠脑髓鞘化从P15已经开始，P30接近成熟；观察髓鞘的最佳时间在30d以后。 　　关键词: 大鼠 脑 髓鞘化 发育 中图法分类号: 　　　文献标识码: The study on myelination of rat brain at different developmental stages ZHANG Yuping, HUANG Qilin, ZHAO Congmin(xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400037, Abstract: Objective　To observe the myelination of rat brain at different developmental stages. Methods　Luxol fast blue stain, Immunohistochemistry and Western-blot were applied to the determine myelin and expression of MBP in brain of SD rats at different developmental stages. Results 　At E18、P0、P2, the brain of rats are nether stained by LFB nor MBP. When P7, the corpus callosum emerges gently staining by LFB. The positive stain of LFB and MBP occurrence in P15 on the corpus callosum. as development going, the stain strong is more obvious, especially in P30, their staining strong is similar with P90 and P720. The results of western-blot show the expression of MBP in rat brain is gradually increasing as development of rat brain. Conclusion　The myelination has started before P15 in rat brain and nearly be mature in P30. The optimal time to observe myelin would be P30 and Key words: rat; brain; myelination; development 髓鞘化是中枢神经系统（CNS）发育成熟的重要标志。发育各期机体的缺氧、损伤、自身免疫机能失调等状况，均会导致CNS髓鞘化障碍，并且在不同的发育阶段表现出不同的损伤特点，成为多种脑白质病发生发展的重要原因。研究和阐明发育过程中CNS髓鞘化的规律及其影响因素无疑对揭示脑白质病的发病机制具有重要意义。在CNS髓鞘相关疾病的基础研究中，常常以大鼠作为研究对象，然而目前有关正常大鼠脑髓鞘发育的研究鲜见报道。为此，本文对不同发育阶段大鼠脑髓鞘的变化规律进行了初步研究，以期为揭示CNS髓鞘相关疾病的发病机制提供实验依据。 1　材料与方法 1. 1 材料 分别取孕14d（E14），18d（E18），出生后0d（P0）、7d（P7）、15d（P15）、30 d（P30）、90d（P90）、720d（P720）的SD大鼠各5只（第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心提供）。以1%戊巴比妥钠按照40 mg/kg腹腔注射麻醉。沿胸骨剑突下打开胸腔，分别从左心室、主动脉插管，剪开右心耳，先灌注生理盐水、再灌注4%的多聚甲醛(4℃)。灌注完毕断头分离脑组织，4%的多聚甲醛后固定12h(4℃)，置30%的蔗糖溶液(0. 1 mol/L PBS配制)脱水24 h(4