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生物技术大实验 主讲教师 刘德立、袁均林、丁书茂、耿 辉 杨继红、祁 超、李 睿、袁永泽 2013.3.8 第二部分 研究性实验（4月至6月） 实验十五至实验二十三 1）植物转基因技术 —— 烟草或拟南芥 2）听力损伤疾病的药理学研究 3）细胞培养——细胞培养技术及其应用 4）环境污染物致生物机体氧化损伤的评价 5）酶工程 ——基因工程酶的分离制备与亲和色谱纯化 6）微生物发酵实验——啤酒的生产工艺 7）免疫组化技术分析HmgD过量表达对果蝇calpain B 基因表达的影响蝇幼虫生长发育的机理 8）蛋白质的原核生物表达与纯化 9）植物细胞、组织与器官技术 （九选一）实验报告或小论文 实验报告记录 1 .预习报告（包括原理、操作方法、 结果与分析、注意事项） 2 .实验记录 3 .结果计算 电子天平的使用 1 开机预热5分钟 2 调节 3 称量（称量纸或称量瓶） 4 复位 5 关机 6 清洁——切忌用抹布！！ 移液器的使用 1 选取合适的移液器 2 选取需要的量，安装枪头 3 取液 4 移液 5 弃枪头 6 清洁后放回枪架 玻璃匀浆器的使用 1 配套使用； 2 将组织块称量后切割成小块投入匀浆器中，加一定量的匀浆液，匀浆； 3 注意在冰浴中进行； 4 用后洗净收好。 小组物品清单 试管架：1个 试管：6个 250ml锥形瓶：2个 100ml锥形瓶：5个 吸耳球：1个 移液管：一套（10ml、5ml、2ml各一支） 洗瓶：1个 量筒：1个 烧杯： 500ml、200ml各一个 研究型实验常用仪器 1. 凝胶成像系统 2. PCR仪 3. 多功能酶标仪 4. 全自动紫外可见分光光度计 5. 超速离心机 6. 流式细胞仪 7. FPLC—快速蛋白质液相色谱 8. 激光共聚焦显微镜 * 生物化学技术大实验安排（2013年3月-6月）第一部分 生物化学分离及检测技术 实验室规则 1．基本规则 （1）衣冠整齐，不迟到，不早退。 （2）实验室严禁吸烟、饮水、进食。 （3）实验室严禁大声说笑和喧哗。 （4）要认真客观的记录实验结果。按时完成实验报告。 （5）自觉维护实验室的清洁卫生，不得随意吐痰和乱扔纸屑。 （6）严格执行卫生值日制。值日同学自觉打扫卫生。 （1）节约用水 （2）注意水龙头是否关好，水池是否堵塞、漏水。 （3）节约用电，不能随意调节空调。 （4）最后离开实验室要注意检查水电、门窗是否关好。 水电、药品和仪器使用规则 1．水电 （1）易燃易爆药品远离火源。 （2）注意有毒和腐蚀性药品的使用方法。 （3）绝对禁止药品试剂间的交互污染。药品试剂使用完 要放回原处。 （4）有毒废弃物要倒至指定地点。 2．药品 （1）爱惜仪器 （2）不得随意操作仪器。 （3）仪器使用过程中出现故障要及时报告，不能自行处理。 3．仪器 1．火 （1）酒精及其它可溶于水的液体着火时，可用水灭火 （2）汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时，应用石棉布或砂土扑灭，绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。 （3）电起火，不能用水和二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。 2．烧伤 （1）强碱烧伤：先用大量水冲洗，再用5%的硼酸溶液和2%的乙酸溶液冲洗。 （2）强酸烧伤：先用大量水冲洗，再用5%的碳酸氢钠或5%的氢氧化铵冲洗。 实验室紧急处理方法 722型分光光度计的使用 本仪器在可见光谱区范围内（360~800nm）进行定量比色分析用。 1．在仪器尚未接通电源时，电表的指针必须位于透光率“0”刻线上，若不是这种情况，可以用电表上的校正螺丝进行调节。 2．接通电源，调节波长，放大器灵敏度旋钮打在第一档。仪器预热20分钟。 3．调“0” 4．调“100” 5．测量读数。 注意事项： （1）不可用手、滤纸、毛刷等摩擦透光面，只能用绸布和擦镜纸擦。 （2）比色皿内液体不可过多或过少，在2/3~3/4之间。 （3）测量时拉动拉杆要轻。 离心机的使用 1 ．接通电源 2 ．平衡加入离心样品 3 ．设置时间 4 ．调节转速 （1）离心前必须仔细检查转头各孔内有无异物。 （2）离心管必须仔细平衡。 （3）机内若不清洁，离心管要封口。 （4）必须慢启动，然后加速。 （5）离心时不准开盖。 （6）不准用手刹车。 注意事项： *