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- 2019-07-02 发布于湖北
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精品 精品 精品 精品 PCR技术的原理与方法 钟召迪 精品 PCR定义 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)简称PCR,是一项在短时间内大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。 是指在DNA 聚合酶的催化下,以母链DNA 为模板,一特定引物为延伸起点,经过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出于母链模板DNA互补的子链DNA的过程。 可用于基因分离克隆,序列分析,基因表达调控,基因多态性研究等。 精品 PCR反应特点 特异性强 灵敏度高 简便、快速 对标本的纯度要求低 精品 PCR技术的基本原理 PCR的反应成分 PCR的反应基本步骤 PCR的反应体系 精品 PCR的反应成分 模板DNA 引物 四种脱氧核糖核苷酸 DNA聚合酶 反应缓冲液,Mg2 精品 PCR的反应基本步骤 PCR的反应基本步骤 变性:高温使双链DNA解离成单链(94 ℃ ,30s) 退火:低温下,引物与DNA模板互补区结合(55 ℃ , 30s ) 延伸:中温延伸,DNA聚合酶催化以引物为起点的DNA链延伸反应(70~72 ℃ ,30~60s) 精品 精品 PCR的反应体系 10×扩增缓冲液 1/10体积
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