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实验一 PDA斜面培养基的制备 一、实验目标: 1、掌握PDA斜面培养基的制备。 2、了解培养基的多样性。 二、仪器设备与材料 电磁炉、锅、高压灭菌锅; 葡萄糖、琼脂、马铃薯。 三、PDA培养基的配方 马铃薯 200克 ;葡萄糖 20克 ; 琼脂 15~20克; 自来水 1000毫升 ; 自然PH 。 高压灭菌锅: (1)手提式 (2)立式 (3)卧式 7、检查灭菌效果 28℃培养2~3天。 * 粉状 条状 三、培养基的制作 1、营养液制作 (1)准备工作 2、称量、材料预处理 按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量100g,切成1cm见方的小块。 3、熬煮 将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,煮至酥而不烂。 4、过滤、加可溶药物 用3层沙布过滤,取滤汁,放在电饭锅中加入糖10g。 5、熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂10g,直到琼脂完全溶化为止,定容至500ml。 6、营养液分装 (1)用注射器分装(直接分装) (2)分装标准:分装量为试管长度的1/4~1/5。注意培养基不能沾污试管口。 (3)塞棉塞 棉塞松紧适度,1/3在管外,2/3在管内。 (4)扎捆 5~6支试管捆在一起,棉塞上包好防水纸,直立放入高压灭菌锅中。 ③灭菌处理 在1.0~1.5 kg/cm2压力下维持20min。 ④ 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝,用余热烘干报纸和 棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2。 *
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